磺化Cy5-羧酸sulfo-cy5 carboxylic acid

概述

磺化Cy5-羧酸（Sulfo-Cy5-carboxylic acid）是一种水溶性的花菁类荧光染料，属于Cy5衍生物。其分子结构中含有磺酸基团，显著提高了水溶性，同时保留了Cy5染料的优异荧光性能。该产品常以羧酸形式提供，可通过活化后与含氨基的生物分子（如蛋白质、抗体、多肽等）共价偶联，广泛应用于生物标记和成像领域。CAS号：1144107-82-3。

理化性质

• 外观：深蓝色至蓝紫色固体粉末
• 分子式：C₃₂H₃₉N₂O₈S₂（基于典型结构，具体以实际产品为准）
• 分子量：约 643.8 g/mol
• 溶解性：易溶于水、甲醇、DMF、DMSO等极性溶剂
• 荧光特性：激发波长（Ex）~649 nm，发射波长（Em）~670 nm（在PBS中）
• 摩尔吸光系数：~250,000 L·mol^-1·cm^-1
• 纯度：≥95%（HPLC）
• 储存条件：避光、干燥、-20°C保存

应用领域

• 生物标记：用于标记蛋白质、抗体、多肽、核酸等生物分子，适用于荧光免疫分析、Western blot、流式细胞术等。
• 细胞成像：用于活细胞或固定细胞的荧光显微成像，尤其适合长时间动态观察。
• 体内成像：由于磺化基团提高了水溶性和生物相容性，可用于小动物活体荧光成像。
• 诊断试剂开发：作为荧光探针的构建单元，用于开发体外诊断试剂。
• 材料科学：用于功能化材料表面的荧光标记。

实验方案建议

1. 储存液配制

• 建议使用无水DMSO或DMF溶解，配制成1-10 mM的储备液，分装后避光保存于-20°C，避免反复冻融。

2. 活化羧基

• 使用EDC/NHS（或EDC/sulfo-NHS）在pH 5.5-6.5的缓冲液（如MES）中活化羧基，室温反应15-30分钟。
• 摩尔比建议：染料:EDC:NHS = 1:1.5:2（可根据实验优化）。

3. 偶联反应

• 将活化后的染料与含氨基的目标分子（如抗体、蛋白质）在pH 7.5-8.5的缓冲液（如PBS或碳酸盐缓冲液）中混合，室温反应1-2小时或4°C过夜。
• 染料与蛋白的摩尔比建议为5-10:1，需根据预实验优化。

4. 纯化

• 使用凝胶过滤层析（如Sephadex G-25）或超滤离心管去除游离染料。
• 可通过测定A₆₄₉和A₂₈₀计算标记率（DOF）。

5. 验证

• 通过SDS-PAGE荧光成像或紫外-可见光谱验证偶联效果。

注意事项：操作时避光，避免使用含氨基的缓冲液（如Tris）在活化步骤中。

储存条件

• 短期储存：2-8°C避光干燥保存，可稳定数月。
• 长期储存：-20°C避光干燥保存，建议充惰性气体（如氮气或氩气）并密封，避免反复冻融。
• 溶液储存：储备液应分装后于-20°C避光保存，避免反复冻融，建议6个月内使用。
• 注意事项：避免接触强氧化剂、强酸强碱，避免光照和潮湿。

相关产品推荐

• Sulfo-Cy5-NHS ester：磺化Cy5的NHS酯，可直接与氨基反应，无需活化。
• Sulfo-Cy5-amine：磺化Cy5的氨基衍生物，可用于标记羧基或进行其他偶联。
• Sulfo-Cy5-maleimide：用于标记巯基（-SH）的磺化Cy5衍生物。
• Sulfo-Cy5-azide：用于点击化学（CuAAC）的磺化Cy5叠氮化物。
• Sulfo-Cy5-alkyne：用于点击化学的磺化Cy5炔烃衍生物。
• Cy5-carboxylic acid（非磺化版）：用于有机溶剂体系的标记。
• Sulfo-Cy3-carboxylic acid：类似物，荧光波长较短。
• Sulfo-Cy7-carboxylic acid：类似物，荧光波长较长。