Cy5-NHS 活化酯Cy5-NHS ester

目录号: PC21411 纯度: COA
Cy5-NHS活化酯(Cyanine 5 N-Hydroxysuccinimide Ester)是一种基于花菁染料的近红外荧光标记试剂,其分子结构由Cy5染料母核与N-羟基琥珀酰亚胺酯(NHS ester)活性基团连接而成,兼具高效的共价偶联能力和优良的光学特性。
Cy5-NHS 活化酯(CAS 1032678-42-4)产品图
CAS No. :1032678-42-4
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中文名称
Cy5-NHS 活化酯
英文名称
Cy5-NHS ester
英文别名
2-[5-(1,3-Dihydro-1,3,3-trimethyl-2H-indol-2-ylidene)-1,3-pentadien-1-yl]-1-[6-[(2,5-dioxo-1-pyrrolidinyl)oxy]-6-oxohexyl]-3,3-dimethyl-3H-indolium chloride (1:1);Lumiprobe Cy 5 NHS ester;Lumiprobe NHS-Cy5;Cyanine5 NHS ester chloride;(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 8-[(2Z)-3,3-dimethyl-2-[(2E,4E)-5-(1,3,3-trimethylindol-1-ium-2-yl)penta-
Cas No.
1032678-42-4
分子式
C38H47ClN3O4
分子量
645.25
详情描述

Cy5-NHS活化酯(Cyanine 5 N-Hydroxysuccinimide Ester)是一种基于花菁染料的近红外荧光标记试剂,其分子结构由Cy5染料母核与N-羟基琥珀酰亚胺酯(NHS ester)活性基团连接而成,兼具高效的共价偶联能力和优良的光学特性。

‌Cy5-NHS的最大激发波长约为649 nm‌,最大发射波长在‌670 nm‌左右,处于近红外“组织光学窗口”内,能有效减少生物组织对光的吸收和散射,从而提升深层组织成像的穿透深度和信噪比;其光稳定性优异,抗光漂白能力强,适用于长时间动态观测;可与绿色或橙红色荧光染料(如AF488、TAMRA)兼容,支持多色荧光联用。‌

性状:深蓝色固体;

溶解度:易溶于DMF等有机溶剂;

标记对象:氨基;

保存:避光,干燥,-20℃保存;

相关分类:Cy系列 (Cyanine);Cy5-NHS

搜索质检报告(COA)

CD40-targeting magnetic nanoparticles for MRI/optical dual-modality molecular imaging of vulnerable atherosclerotic plaques.

Atherosclerosis 2023. DOI: 10.1016/j.atherosclerosis.2023.02.008 相关性评分:16

该文献使用Cy5.5-NHS酯(而非目标产品Cy5-NHS酯)与CD40抗体和SPIONs偶联,构建靶向探针。Cy5.5是Cy5的衍生染料,但并非目标化合物的直接衍生物(结构不同,光谱略有差异),因此化合物匹配度较低(2分)。应用场景为动脉粥样硬化斑块的荧光/MRI双模态成像,涉及荧光标记、细胞成像和活体成像,与产品分类描述的应用领域(细胞成像、活体成像、标记等)高度相关(4分)。实验模型包括RAW 264.7细胞、MOVAS细胞和ApoE-/-动脉粥样硬化小鼠模型,与产品预期生物应用领域一致(4分)。文献提供了荧光成像和MRI结果,但未专门针对Cy5.5-NHS酯的光谱数据、标记效率、细胞毒性或光稳定性进行表征,方法学严谨性一般(3分)。期刊Atherosclerosis为领域内权威期刊,但研究创新性中等,引用潜力一般(3分)。总分16分。

Human Nanoplatelets as Living Vehicles for Tumor-Targeted Endocytosis In Vitro and Imaging In Vivo

Journal of Clinical Medicine 2023. DOI: 10.3390/jcm12041592 相关性评分:18

文献明确将Cy5偶联到纳米血小板表面用于肿瘤靶向的近红外荧光成像和流式细胞分析,应用场景(活体成像、细胞标记、流式细胞术)与Cy5-NHS活化酯的预期用途高度契合。然而,文献仅提及使用Cy5染料进行表面偶联,未明确说明使用的是Cy5-NHS活化酯(CAS 1032678-42-4)这一具体化合物形式,也未提供该染料的光谱表征、标记效率或稳定性数据,因此化合物匹配度和方法严谨性得分中等。实验模型包括人骨髓瘤细胞系和小鼠异种移植瘤,与产品在肿瘤成像和细胞标记方面的应用一致。期刊为临床医学类开放获取期刊,影响力一般。

Nanomolar Protein Thermal Profiling with Modified Cyanine Dyes

Analytical Chemistry 2023. DOI: 10.1021/acs.analchem.3c02844 相关性评分:15

文献设计并合成了一系列基于Cy5染料母核的猝灭剂分子(含吲哚啉环和/或侧链修饰),用于蛋白质热稳定性分析和蛋白-配体相互作用研究。这些Cy5衍生物在结构上属于Cy5染料家族,但并非目标产品Cy5-NHS活化酯(CAS 1032678-42-4),也未使用NHS酯活性基团进行氨基标记,因此化合物匹配度较低。应用场景涉及蛋白标记与检测(通过Eu标记肽探针与Cy5猝灭剂相互作用),与Cy5-NHS用于氨基标记蛋白有一定关联,但具体机制不同(猝灭而非共价荧光标记)。实验模型为纯化蛋白/肽体系,与产品预期的细胞成像或蛋白标记应用部分一致。方法学上提供了猝灭效率、浓度优化等数据,但未提供目标化合物的光谱、标记效率或细胞毒性等关键表征。期刊Analytical Chemistry级别较高,研究具有创新性,影响力较好。总体相关性中等偏低。

Tuning the Polarity of Antibiotic‐Cy5 Conjugates Enables Highly Selective Labeling of Binding Sites

Chemistry – A European Journal 2023. DOI: 10.1002/chem.202301208 相关性评分:16

文献描述了13个新的抗生素-Cy5染料偶联物的制备和生物学评估,其中Cy5染料的极性调节是关键。但摘要未明确说明使用的是Cy5-NHS活化酯(CAS: 1032678-42-4)还是其他Cy5衍生物(如Cy5马来酰亚胺或Cy5叠氮化物)。Cy5-NHS是常用的氨基反应性标记试剂,可能用于偶联抗生素上的氨基,但文献未明确提及,因此化合物匹配度中等。应用场景为细菌标记和结合位点成像,与产品分类描述的细胞成像、标记等有一定相关性,但并非直接匹配。实验模型为细菌体系,与产品预期应用领域(如细胞成像、活体成像)部分一致。数据与方法严谨性方面,文献可能提供了光谱和标记效率数据,但摘要未明确提及关键表征数据。期刊为Chemistry – A European Journal,影响因子较高,研究创新性较好,因此影响力评分较高。总体而言,文献可能使用了Cy5-NHS或类似衍生物,但未明确确认,相关性中等。

A specific and adaptable approach to track CD206+ macrophages by molecular MRI and fluorescence imaging

Theranostics 2024. DOI: 10.7150/thno.96488 相关性评分:16

文献合成了MR1-cy5和MR2-cy5荧光探针,其中cy5为荧光基团,但并非直接使用目标产品Cy5-NHS活化酯(CAS 1032678-42-4),而是将Cy5衍生物偶联到甘露糖靶向分子上,属于Cy5染料母核的间接使用,故化合物匹配度较低(2分)。应用场景涉及巨噬细胞靶向荧光成像,与Cy5系列在细胞/活体成像中的应用有一定契合,但更侧重于靶向探针而非通用标记试剂,应用相关性中等(3分)。实验模型包括RAW 264.7巨噬细胞、伤口愈合模型、胶质瘤模型和卒中模型,与Cy5-NHS常用于的细胞标记和活体成像场景较为一致(4分)。文献提供了荧光显微镜成像数据,但未对Cy5的光谱特性、标记效率、细胞毒性或光稳定性进行系统表征,方法学严谨性一般(3分)。期刊Theranostics为领域内高影响力期刊(H指数219),研究具有创新性和转化潜力,影响力较高(4分)。总体而言,文献使用了含Cy5的衍生物探针,但未直接研究目标产品Cy5-NHS活化酯,相关性有限。

Functionalization of 1,3,5‐Triazines: A Modular Entry to Cyanine‐Conjugated Imaging Probes

European Journal of Organic Chemistry 2025. DOI: 10.1002/ejoc.202500938 相关性评分:15

文献报道了一种基于1,3,5-三嗪的模块化合成策略,用于构建花菁染料偶联的双模态成像探针(FLI/PET)。文中明确使用了Cy5染料(而非Cy5-NHS活化酯)与DOTA螯合剂进行正交偶联,并指出化合物19的光学性质与商业Cy5相当。因此,文献仅使用了同类Cy5染料,并未使用或研究目标产品Cy5-NHS活化酯或其直接衍生物,化合物匹配度低(2分)。应用场景涉及荧光成像及双模态探针,与Cy5系列产品的生物成像应用领域高度相关(4分)。实验模型涉及PSMA靶向的DUPA配体及DOTA螯合,但未使用细胞或动物模型进行验证,模型匹配度一般(3分)。文献提供了光学性质比较数据,但缺乏对Cy5-NHS活化酯的标记效率、细胞毒性或光稳定性等关键表征,方法学严谨性中等(3分)。期刊为European Journal of Organic Chemistry,属于中等影响力有机化学期刊,研究具有一定创新性但引用潜力有限(3分)。

Advancing fluorescence imaging: enhanced control of cyanine dye-doped silica nanoparticles.

Journal of nanobiotechnology 2024. DOI: 10.1186/s12951-024-02638-7 相关性评分:17

该文献关键词提到'Cyanine N-hydroxysuccinimide ester',但摘要明确说明使用的是Cy3.5、Cy5.5和Cy7染料掺杂的二氧化硅纳米颗粒,并非目标产品Cy5-NHS活化酯(CAS: 1032678-42-4)。因此化合物匹配度较低(2分),文献仅涉及同类花菁染料的NHS酯,而非直接使用或研究Cy5-NHS。应用场景为体外和体内荧光成像,与产品描述中的生物成像应用高度契合(4分)。实验模型包括细胞摄取、长期追踪和小鼠活体成像,与产品预期应用领域一致(4分)。文献提供了荧光光谱、细胞毒性、摄取效率等数据,但未针对Cy5-NHS本身进行表征,方法严谨性中等(3分)。期刊为Journal of Nanobiotechnology,影响因子和引用潜力较高,研究具有一定创新性(4分)。总分17分。

A STORM-based protocol for nanoscale imaging and quantitative analysis of protein-associated and phospholipid-associated structures in natural rubber.

Micron (Oxford, England : 1993) 2026. DOI: 10.1016/j.micron.2026.104099 相关性评分:19

该文献明确使用Cy5 NHS ester(即目标产品)对天然橡胶中蛋白相关伯胺进行标记,并用于STORM超分辨成像,化合物匹配度很高。应用场景为超分辨显微成像,与Cy5-NHS作为荧光标记试剂的用途相关,但研究对象为疏水高分子材料(天然橡胶)而非典型生物体系,与产品描述中的细胞/组织成像等生物应用契合度中等。实验模型为天然橡胶样品而非细胞或动物模型,与产品预期生物应用领域一致性有限。方法学严谨性突出:提供了Cy5的定位精度(11.8±2.3 nm)、有效分辨率(约25 nm),并设置了未标记、单色、仅染料基质及Cy5对照,数据详实。期刊为Micron,影响力中等,创新性在于标准化STORM协议而非染料本身,引用潜力一般。

A zero intrinsic fluorescence Cy5 probe with dual-PET quenching for highly sensitive and instrument-independent HClO imaging in tumor and wound models

Sensors and Actuators B: Chemical 2026. DOI: 10.1016/j.snb.2026.140477 相关性评分:18

该文献报道了一种基于Cy5荧光团的双PET淬灭零本底荧光探针,用于HClO的灵敏成像。文献明确使用了Cy5染料母核,但并非目标产品Cy5-NHS活化酯或其直接衍生物(NHS酯是氨基反应性标记试剂,而该探针为HClO响应型传感分子),因此化合物匹配度较低(2分)。应用场景为活体/组织成像(肿瘤和伤口模型),与Cy5-NHS的近红外成像应用领域高度契合(4分)。实验模型包括肿瘤和伤口模型,与产品预期生物应用一致(5分)。文献可能提供了探针的光谱和响应性能数据,但缺乏针对Cy5-NHS的标记效率、细胞毒性或光稳定性等关键表征(3分)。期刊Sensors and Actuators B为化学传感领域权威期刊,研究具有创新性(4分)。总体而言,文献与目标产品相关性中等偏下,主要因化合物不直接匹配。

Charge transfer modulation in anionic Cy5-Protein afterglow nanoprobe enables precise pancreatic cancer surgery and efficient metastasis inhibition

Biomaterials 2026. DOI: 10.1016/j.biomaterials.2026.124392 相关性评分:23

该文献标题明确提及'anionic Cy5-Protein afterglow nanoprobe',表明使用了Cy5染料(很可能通过Cy5-NHS活化酯与蛋白质氨基偶联制备探针),属于目标化合物的直接应用范畴,但标题未明确指明使用Cy5-NHS酯本身,故化合物匹配度评为4分。应用场景为胰腺癌精准手术导航及抑制转移的活体成像,与Cy5-NHS近红外荧光标记试剂的核心应用(活体成像、深层组织成像)高度契合,评5分。研究采用胰腺癌手术模型(细胞系/动物模型),与产品预期生物应用领域一致,评5分。作为Biomaterials期刊论文,通常包含光谱表征、标记效率及成像性能数据,但摘要缺失无法完全确认关键表征细节,评4分。Biomaterials为生物材料领域顶级期刊(H指数489,2年引用率10.0),研究创新性强(电荷转移调控余辉纳米探针+精准手术),影响力评5分。文献确实使用了Cy5染料衍生物构建探针,而非仅提及同类染料,整体相关性高。

1:一般建议:溶解度为Medlife测试数据,可能与文献描述存在差异。这是由于生产工艺和批次不同产生的正常现象。为了使其更好的溶解,请用37℃加热试管并在超声波水浴中震动片刻。不同批次产品溶解度各有差异,仅做参考,具体以实验方案为准。

2:储存条件:粉末-20°C一般情况可以保存3年,溶于溶剂-80°C一般情况可以保存1年。不同产品及不同批次产品可能存在差异,请细致阅读产品信息,并辅助参考相关文献描述。

概述

Cy5-NHS 活化酯(Cyanine 5 N-Hydroxysuccinimide Ester,货号 PC21411,CAS 号 1032678-42-4)是一种基于花菁染料的近红外荧光标记试剂。其分子结构由 Cy5 染料母核与 N-羟基琥珀酰亚胺酯(NHS ester)活性基团连接而成,兼具高效的共价偶联能力和优良的光学特性。该试剂可与含伯氨基(-NH2)的分子(如蛋白质、抗体、多肽、核酸等)发生反应,形成稳定的酰胺键,实现荧光标记。Cy5-NHS 的最大激发波长约为 649 nm,最大发射波长在 670 nm 左右,处于近红外“组织光学窗口”内,能有效减少生物组织对光的吸收和散射,从而提升深层组织成像的穿透深度和信噪比;其光稳定性优异,抗光漂白能力强,适用于长时间动态观测;可与绿色或橙红色荧光染料(如 AF488、TAMRA)兼容,支持多色荧光联用。

理化性质

外观: 深蓝色固体

溶解性: 易溶于 DMF、DMSO 等有机溶剂,在水相中需现配现用(建议先用无水有机溶剂溶解后加入缓冲液)。

光谱特性: 最大激发波长(λex)≈ 649 nm,最大发射波长(λem)≈ 670 nm(近红外区)。

活性基团: NHS 酯,可与伯氨基(-NH2)在温和条件下(pH 7.2-8.5)反应形成共价酰胺键。

稳定性: 对光和湿气敏感,需避光、干燥、低温保存。

分子量: 约 634.2 g/mol(以常见 Cy5-NHS 结构计,具体以实际批次为准)。

应用领域

  • 生物分子标记: 用于标记蛋白质、抗体、多肽、核酸等含氨基的生物分子,适用于荧光免疫分析、Western Blot、细胞成像等。
  • 体内/体外成像: 近红外荧光特性使其适用于小动物活体成像、深层组织成像及血管成像。
  • 流式细胞术: 可标记抗体用于多色流式分析。
  • 荧光探针构建: 作为近红外荧光模块,用于构建靶向探针、传感器等。
  • 多色荧光联用: 与 AF488、TAMRA 等染料搭配,实现多通道检测。

实验方案建议

1. 试剂准备

  • 将 Cy5-NHS 活化酯从 -20℃ 取出,平衡至室温后再打开,避免吸潮。
  • 用无水 DMF 或 DMSO 溶解,配制成 10 mM 储备液(建议现配现用,或分装后 -20℃ 避光保存,避免反复冻融)。

2. 标记反应(以抗体为例)

  • 将抗体溶于 PBS(pH 7.4)或碳酸盐缓冲液(pH 8.0-8.5)中,浓度建议 1-2 mg/mL。
  • 按 Cy5-NHS 与抗体摩尔比 5-10:1 加入储备液,轻轻混匀。
  • 室温避光反应 1-2 小时(或 4℃ 过夜)。

3. 纯化

  • 使用凝胶过滤柱(如 Sephadex G-25)或透析去除游离染料,收集标记产物。
  • 测定标记效率:计算染料/蛋白摩尔比(DOL),通常建议 DOL 在 3-7 之间。

4. 验证

  • 通过 SDS-PAGE 荧光成像或紫外-可见分光光度法(A649 和 A280)确认标记效果。

注意事项: 反应缓冲液中避免含有伯氨基(如 Tris、甘氨酸),以免竞争反应;操作全程避光。

储存条件

  • 储存温度: -20℃ 避光、干燥保存。
  • 储存形式: 固体粉末或有机溶剂储备液(分装后 -20℃ 避光保存)。
  • 注意事项: 避免反复冻融和暴露于潮湿环境;储备液建议用无水 DMF 或 DMSO 配制,并充惰性气体保存。
  • 保质期: 在推荐条件下保存,自收到之日起 12 个月内使用。

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Q1:Cy5-NHS 活化酯的荧光激发和发射波长是多少?

Cy5-NHS 活化酯的激发波长通常在 649 nm 左右,发射波长在 670 nm 左右,属于近红外荧光染料。具体数值可能因溶剂环境和仪器校准略有差异,建议查看产品说明书或 COA 确认。该波长范围适合大多数配备 633 nm 或 647 nm 激光器的流式细胞仪和荧光显微镜。

Q2:Cy5-NHS 活化酯应该用什么溶剂溶解?配成储备液后能保存多久?

建议先用无水 DMSO 或 DMF 溶解,配制成适当浓度的储备液。NHS 酯对水分敏感,易水解失活,因此溶剂需严格无水。储备液建议分装后于 -20℃ 避光干燥保存,避免反复冻融。具体浓度和保存期限请参考产品说明书或 COA,不同批次可能有差异。

Q3:Cy5-NHS 活化酯干粉在 -20℃ 能保存多久?需要避光吗?

干粉在 -20℃ 避光干燥条件下通常可稳定保存较长时间,具体有效期请以产品标签或 COA 为准。Cy5 染料对光敏感,NHS 酯对湿气敏感,因此务必密封避光保存,使用前平衡至室温再开盖,避免冷凝水导致水解。

Q4:如何确认 Cy5-NHS 活化酯的纯度和活性酯含量?

可通过 HPLC 或 LC-MS 检查纯度,并通过 NMR 或紫外-可见光谱确认结构。活性酯含量可用羟胺法滴定或与模型胺反应后分析。具体质检方法请参照产品 COA,若需批次特异的纯度数据,请联系技术支持获取。

Q5:用 Cy5-NHS 标记抗体时,染料与抗体的摩尔比多少合适?

标记抗体时,染料与抗体的起始摩尔比通常建议在 5:1 到 20:1 之间,具体需根据抗体浓度和所需标记度优化。比例过高可能导致抗体失活或聚集,过低则信号弱。建议先做小规模预实验,并参考产品说明书或联系技术支持获取建议。

Q6:Cy5-NHS 标记反应缓冲液可以用含 Tris 或甘氨酸的缓冲液吗?

不可以。Tris、甘氨酸等含伯氨基的缓冲液会与 NHS 酯竞争反应,降低标记效率。建议使用不含伯氨基的缓冲液,如 PBS 或碳酸氢钠缓冲液,pH 控制在 7.5-8.5 之间。反应结束后可加入甘氨酸或 Tris 淬灭未反应的 NHS 酯。

Q7:Cy5-NHS 活化酯运输条件是什么?需要干冰吗?

Cy5-NHS 活化酯通常可在室温或蓝冰条件下运输,具体条件请以产品包装和说明书为准。收到后应按照标签要求储存,一般建议 -20℃ 避光干燥保存。若需确认批次运输条件,请联系技术支持。

Q8:Cy5-NHS 标记后的蛋白如何去除游离染料?

常用方法包括凝胶过滤层析(如 Sephadex G-25)、透析或超滤离心。凝胶过滤速度快、回收率高,适合多数蛋白;超滤需选择合适截留分子量的膜。去除游离染料后,可通过测定染料与蛋白的吸光度比计算标记度。具体操作请参考产品说明书或联系技术支持。

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The molarity calculator equation
Mass (g) = Concentration (mol/L) × Volume (L) × Molecular Weight (g/mol)
The dilution calculator equation
Concentration (start) × Volume (start) = Concentration (final) × Volume (final)
This equation is commonly abbreviated as: C1V1 = C2V2