磺化Cy3-DBCO

概述

磺化Cy3-DBCO（Sulf-Cy3-DBCO，货号PC21402，CAS号1782950-79-1）是Cyanine3荧光团的衍生物，是一种pH（4-10）不敏感的橙红色荧光染料，激发波长和发射波长分别为555 nm和580 nm。该染料含有DBCO基团，可与含叠氮基团的分子发生环张力促进的炔-叠氮环加成反应（SPAAC），是一种高效的点击化学试剂。磺化修饰显著提高了水溶性，使其极易溶于水，适用于多种生物标记和成像应用。

理化性质

• 外观：红色粉末
• 分子式：C₄₂H₄₅N₄O₇S₂（基于典型结构，实际以产品COA为准）
• 分子量：约797.96 g/mol
• 溶解性：易溶于甲醇、DMF等有机溶剂，极易溶于水
• 荧光特性：激发波长（Ex）555 nm，发射波长（Em）580 nm
• pH敏感性：不敏感（pH 4-10）
• 反应基团：DBCO（二苯并环辛炔），用于无铜点击化学反应（SPAAC）
• 储存条件：避光，-20℃保存

应用领域

• 生物标记：用于标记含叠氮基团的蛋白质、抗体、核酸等生物分子，实现荧光检测。
• 细胞成像：适用于活细胞或固定细胞的荧光成像，得益于其良好的水溶性和细胞膜通透性。
• 点击化学：作为DBCO试剂，参与应变促进的炔-叠氮环加成反应（SPAAC），无需铜催化剂，适合生物体系。
• 流式细胞术：可用于流式细胞分析中的荧光标记。
• 荧光共振能量转移（FRET）：可作为供体或受体染料用于FRET研究。
• 材料科学：用于功能化材料表面的荧光标记。

实验方案建议

1. 储备液配制

• 建议使用无水DMSO或DMF配制储备液，浓度通常为1-10 mM。磺化Cy3-DBCO极易溶于水，也可直接用水配制，但需确保水质纯净（如超纯水）。
• 储备液应避光保存，可分装后于-20℃储存，避免反复冻融。

2. 标记反应（SPAAC）

• 将含叠氮基团的生物分子（如蛋白质）溶解于适当缓冲液（如PBS，pH 7.4）中。
• 按摩尔比（染料:底物 = 2-5:1）加入磺化Cy3-DBCO储备液，轻轻混匀。
• 室温避光反应1-2小时，或4℃过夜。
• 反应完成后，可通过透析、凝胶过滤或超滤去除游离染料。

3. 纯化与验证

• 使用SDS-PAGE或质谱验证标记效率。
• 通过荧光分光光度计测定标记物的荧光强度。

4. 注意事项

• 反应体系避免含伯胺或巯基的缓冲液（如Tris、甘氨酸），以防干扰。
• 全程避光操作，减少荧光淬灭。

储存条件

• 储存温度：-20℃避光保存
• 储存形式：粉末或储备液（建议分装）
• 稳定性：在推荐条件下可稳定保存12个月。储备液应避免反复冻融，建议在-20℃下保存于无水有机溶剂中，可稳定数月。
• 注意事项：保持干燥，避免光照和潮湿，远离氧化剂。

相关产品推荐

• 磺化Cy3-叠氮（Sulfo-Cy3-Azide）：用于与DBCO修饰分子的点击反应。
• 磺化Cy5-DBCO（Sulfo-Cy5-DBCO）：近红外荧光染料，适用于深层组织成像。
• Cy3-DBCO（非磺化版）：用于有机相或低水溶性环境。
• 磺化Cy3-马来酰亚胺（Sulfo-Cy3-Maleimide）：用于巯基标记。
• DBCO-PEG4-生物素：用于亲和素-生物素放大系统。
• 叠氮修饰的蛋白质标记试剂盒：提供完整的标记解决方案。