磺酸基-Cy3-甲基 琥珀酰亚胺酯（橙红色）Sulfo-Cy3-M SE (Orange Red)

概述

磺酸基-Cy3-甲基 琥珀酰亚胺酯（橙红色）是一种水溶性荧光染料，属于花菁染料Cy3的衍生物，带有磺酸基团和甲基取代，并以琥珀酰亚胺酯（NHS ester）形式提供。该产品专为生物标记设计，可与伯氨基（如蛋白质、多肽、抗体等）高效反应，形成稳定的酰胺键。其橙红色荧光（激发/发射波长约550/570 nm）适用于多种荧光检测技术。CAS号：1424150-38-8（钠盐），相关CAS号：1424433-17-9，1518643-34-9（内盐）。

理化性质

• 外观：橙红色至红色固体粉末
• 分子式：C₃₅H₄₁N₃O₁₀S₂（钠盐形式，具体以实际批次为准）
• 分子量：约743.84 g/mol（钠盐）
• 溶解性：易溶于水、DMSO、DMF等极性溶剂，微溶于甲醇、乙醇
• 荧光特性：激发波长（Ex）~550 nm，发射波长（Em）~570 nm（橙红色荧光）
• 储存条件：-20°C避光干燥保存，避免反复冻融
• 稳定性：对光敏感，在水溶液中易水解，建议现配现用
• 纯度：≥95%（HPLC）

应用领域

• 蛋白质标记：用于抗体、蛋白质的荧光标记，适用于免疫荧光（IF）、流式细胞术（FACS）、Western blot等。
• 核酸标记：可标记氨基修饰的寡核苷酸，用于FISH、基因芯片等。
• 细胞成像：活细胞或固定细胞的荧光成像，追踪生物分子。
• FRET分析：作为供体或受体染料，用于荧光共振能量转移研究。
• 药物递送研究：标记纳米颗粒、脂质体等，追踪其体内分布。
• 多色荧光分析：与其它荧光染料（如FITC、Cy5）配合使用，进行多重检测。

实验方案建议

1. 标记缓冲液准备

推荐使用不含氨基的缓冲液（如PBS、碳酸氢钠缓冲液），pH 7.2-8.5。避免使用Tris、甘氨酸等含氨基的缓冲液。

2. 染料储备液配制

将产品溶于无水DMSO或DMF，配制成1-10 mM储备液，避光保存，现配现用。

3. 标记反应

• 蛋白质标记：按染料与蛋白质摩尔比（通常5-10:1）混合，室温避光反应1-2小时。
• 核酸标记：氨基修饰的核酸与染料按10-20:1摩尔比混合，室温反应2-4小时。

4. 纯化

使用凝胶过滤（如Sephadex G-25）或透析去除游离染料。

5. 验证

通过紫外-可见分光光度计测定标记效率（计算DOL），或通过荧光成像检测标记效果。

6. 注意事项

• 反应体系避免含有伯氨基的杂质。
• 染料水解会降低标记效率，建议控制反应时间。
• 操作时避光，防止荧光淬灭。

储存条件

• 长期储存：-20°C避光干燥保存，有效期24个月。
• 短期储存：4°C避光干燥保存，有效期1个月。
• 溶液储存：DMSO储备液分装后-20°C避光保存，避免反复冻融，建议1个月内使用。
• 运输条件：室温运输，避光防潮。

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