磺化Cy3-炔烃Sulfo-Cyanine3 alkyne

概述

磺化Cy3-炔烃（Sulfo-Cy3-alkyne，货号PC21403，CAS号2055138-88-8）是一种基于经典花青素类荧光染料Cy3的衍生物，具有高量子产率（0.3-0.5）、优异的光稳定性（光漂白速率较传统荧光素降低40%以上）和良好的水溶性（水中溶解度>10 mg/mL）。其炔烃官能团可通过铜催化叠氮-炔环加成反应（CuAAC）与叠氮化物高效偶联（反应效率>90%），实现生物分子的荧光标记。该产品适用于长时间动态追踪、细胞成像及多组学研究，是点击化学标记的强力工具。

理化性质

• 外观：红色粉末
• 分子式：C₃₄H₄₀N₂O₇S₂（基于典型结构，实际以产品质检报告为准）
• 分子量：约676.82 g/mol
• 溶解性：易溶于甲醇、DMF等有机溶剂，极易溶于水（>10 mg/mL）
• 荧光特性：激发波长（Ex）550-560 nm，发射波长（Em）约570 nm，量子产率0.3-0.5
• 光稳定性：优于传统荧光素，光漂白速率降低40%以上
• 反应性：炔烃基团可与叠氮化物在Cu(I)催化下发生环加成反应（CuAAC），反应条件温和（室温、pH 6-8）
• 储存条件：避光，-20℃保存

应用领域

• 细胞成像：适用于活细胞或固定细胞的长时间动态追踪和荧光成像，得益于优异的光稳定性和水溶性。
• 生物分子标记：通过点击化学标记蛋白质、核酸、脂质等含叠氮基团的生物分子，用于检测、分离或功能研究。
• 多组学研究：在蛋白质组学、代谢组学等多组学分析中作为荧光标签，提高检测灵敏度和准确性。
• 流式细胞术：标记细胞表面或细胞内靶标，用于流式细胞分析。
• 药物递送研究：标记纳米载体或药物分子，追踪其在细胞或体内的分布。

实验方案建议

1. 标记反应（CuAAC点击化学）

• 反应体系：将含叠氮基团的生物分子（如蛋白质、核酸）溶解于PBS（pH 7.4）或适当缓冲液中，加入磺化Cy3-炔烃（建议摩尔比1:2至1:5，过量染料确保完全标记），然后加入Cu(I)催化剂（如CuSO₄与抗坏血酸钠原位生成Cu(I)，或使用BTTAA等配体稳定的Cu(I)催化剂）。
• 反应条件：室温避光反应1-2小时，pH控制在6-8。
• 终止与纯化：反应结束后，可通过透析、凝胶过滤或超滤去除游离染料，标记产物避光保存。

2. 细胞成像实验

• 标记细胞：将细胞与含叠氮基团的代谢前体（如Ac₄GalNAz用于糖蛋白标记）孵育，使叠氮基团整合入目标分子，然后加入磺化Cy3-炔烃进行点击反应（终浓度1-10 μM），孵育30-60分钟。
• 洗涤：用PBS洗涤细胞3次，去除未反应染料。
• 成像：使用配备Cy3滤光片（Ex/Em ~550/570 nm）的荧光显微镜进行观察。建议设置未标记对照组。

3. 注意事项

• 反应需避光操作，防止荧光淬灭。
• 铜催化剂可能对活细胞有毒性，活细胞标记建议使用低浓度铜催化剂或使用无铜点击化学（如DBCO-叠氮反应，但本品为炔烃，需铜催化）。
• 染料储备液建议用无水DMSO或DMF配制，分装避光保存，避免反复冻融。
• 实验废弃物应按实验室规范处理。

储存条件

• 储存温度：-20℃避光保存，避免反复冻融。
• 储存形式：粉末形式在-20℃下可稳定保存2年；溶液形式建议分装后于-20℃（或-80℃）避光保存，6个月内使用。
• 注意事项：保持干燥，避免接触强光、潮湿和氧化剂。取用时应平衡至室温后再打开包装，防止吸潮。

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