磺化Cy3-叠氮Sulfo-Cyanine3 azide

概述

磺化Cy3-叠氮（Sulfo-Cy3 Azide，货号PC21401，CAS号2055138-89-9）是一种水溶性荧光染料，含有叠氮基团，可通过点击化学实现生物分子的荧光标记。其磺化结构赋予其优异的水溶性，适用于蛋白质等敏感分子的标记。该产品可用于铜催化的叠氮-炔环加成反应（CuAAC）和环张力促进的炔-叠氮环加成反应（SPAAC），分别与炔烃或DBCO/BCN基团反应。

理化性质

应用领域

• 生物标记：蛋白质、抗体、多肽等生物分子的荧光标记。
• 点击化学：与炔烃（CuAAC）或DBCO/BCN（SPAAC）修饰的分子偶联，用于生物正交标记。
• 细胞成像：活细胞或固定细胞的荧光成像，得益于水溶性和低背景。
• 流式细胞术：标记细胞表面或细胞内靶标。
• 核酸标记：通过点击化学标记炔烃修饰的核酸。
• 材料科学：功能化材料表面的荧光修饰。

实验方案建议

1. 储备液配制

• 推荐使用无水DMSO或DMF溶解，配制成1-10 mM储备液，避光保存，现配现用。
• 水溶性极佳，也可直接用缓冲液（如PBS）配制，但需注意叠氮基团在含水体系中的稳定性。

2. CuAAC反应（铜催化）

• 反应体系：目标炔烃修饰分子（如蛋白质）、磺化Cy3-叠氮（过量5-10倍摩尔比）、CuSO4（1-2 mM）、还原剂（如抗坏血酸钠，5-10 mM）、配体（如THPTA或TBTA，可选）。
• 缓冲液：PBS（pH 7.4）或Tris-HCl，避免含叠氮化钠的缓冲液。
• 条件：室温反应1-2小时，避光。
• 纯化：透析、凝胶过滤或HPLC去除游离染料。

3. SPAAC反应（无铜）

• 反应体系：目标DBCO/BCN修饰分子与磺化Cy3-叠氮（1-2倍摩尔比）混合。
• 缓冲液：PBS或生理缓冲液。
• 条件：室温反应1-4小时，避光。
• 纯化：同上。

4. 标记效率检测

• 通过紫外-可见分光光度法测定染料浓度（ε≈150,000 M⁻¹cm⁻¹ at 550 nm）。
• 通过SDS-PAGE荧光成像或质谱确认标记。

5. 注意事项

• 反应需避光，减少荧光淬灭。
• CuAAC中铜离子可能损伤蛋白质，建议使用氨基胍或EDTA终止反应。
• 叠氮化合物具有潜在爆炸性，避免与强酸、重金属接触，操作时佩戴防护装备。

储存条件

• 储存：避光，-20℃干燥保存，避免反复冻融。
• 稳定性：在推荐条件下稳定24个月。
• 运输：室温运输，避光防潮。
• 注意事项：叠氮化合物应避免与酸、重金属盐接触，防止爆炸风险。

相关产品推荐

• 磺化Cy3-炔烃（货号：PC21402）：用于CuAAC与叠氮修饰分子偶联。
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