Cy5.5-炔烃Cyanine5.5 alkyne

概述

Cy5.5-炔烃（货号：PC21420，CAS号：1628790-37-3）是一种近红外荧光染料，其结构中含有炔基，可通过铜催化的叠氮-炔环加成反应（CuAAC）与叠氮修饰的生物分子共价结合，实现生物正交标记。该染料发射波长位于近红外区域（约700 nm），适用于活体成像及低背景荧光检测。

理化性质

• 外观：深蓝色固体
• 分子式：C₄₁H₄₇N₃O₂（基于典型Cy5.5炔烃结构）
• 分子量：约625.8 g/mol
• 溶解度：可溶于氯仿、甲醇、乙腈、DMF等有机溶剂，微溶于水
• 荧光特性：最大激发波长（Ex）约678 nm，最大发射波长（Em）约701 nm（在甲醇中）
• 储存条件：避光、干燥、-20°C保存
• 稳定性：在避光干燥条件下稳定，避免反复冻融

应用领域

• 生物标记：通过点击化学标记蛋白质、抗体、多肽、核酸（DNA/RNA）及纳米颗粒等。
• 活体成像：近红外荧光适用于小动物活体成像，组织穿透深、背景低。
• 细胞成像：用于固定或活细胞的特异性荧光标记。
• 诊断开发：作为近红外探针用于体外诊断试剂开发。
• 材料科学：功能化纳米材料及生物相容性涂层研究。

实验方案建议

1. 储备液配制

• 推荐使用无水DMSO或DMF配制1-10 mM储备液，分装后-20°C避光保存，避免反复冻融。

2. 点击化学反应（CuAAC）

• 典型反应体系：含叠氮修饰的生物分子（如蛋白质、核酸）与Cy5.5-炔烃（摩尔比1:1至1:5），在含铜催化剂（如CuSO₄/抗坏血酸钠）的缓冲液（如PBS, pH 7.4）中进行，室温反应1-2小时。
• 注意事项：铜离子可能对某些蛋白质活性有影响，可选用铜螯合剂（如THPTA）或使用无铜点击化学（如DBCO-叠氮反应）替代。

3. 标记产物纯化

• 反应后可通过透析、凝胶过滤（如Sephadex G-25）或超滤离心管去除游离染料。

4. 荧光检测

• 激发波长约678 nm，发射波长约701 nm，使用近红外荧光成像系统或配备相应滤光片的荧光显微镜检测。

5. 活体成像建议

• 标记物注射后，根据探针分布选择合适时间点进行成像，建议使用近红外成像系统，曝光时间根据信号强度调整。

储存条件

• 短期储存：避光、干燥、2-8°C保存，可稳定数周。
• 长期储存：避光、干燥、-20°C保存，建议分装以避免反复冻融。
• 溶液储存：储备液应避光保存于-20°C，建议一个月内使用。
• 运输条件：室温避光运输，避免高温和潮湿。

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