Cy5.5-甲基 羧酸（远红外）Cy5.5-M Free Acid (FIR)

概述

Cy5.5-甲基 羧酸（远红外）是一种远红外荧光染料，属于花菁染料家族，激发和发射波长均在远红外区域，适用于生物标记和成像。该产品为游离酸形式，可通过羧基与氨基反应形成稳定的酰胺键，用于标记蛋白质、抗体、多肽等生物分子。其远红外荧光特性使其在活体成像和深层组织检测中具有优势，可减少背景自发荧光。

理化性质

• 化学名称：Cy5.5-甲基 羧酸（远红外）
• CAS号：1449661-34-0（无阴离子形式）；相关CAS号：1449612-07-0（内盐形式）
• 分子式：C₄₁H₄₇N₂O₂⁺（基于典型结构，具体以实际产品为准）
• 分子量：约 599.83 g/mol（游离酸形式）
• 外观：深蓝色至深绿色固体粉末
• 溶解性：易溶于二甲基亚砜（DMSO）、N,N-二甲基甲酰胺（DMF）等极性有机溶剂，微溶于水
• 光谱特性：
• 激发波长（Ex）：约 675 nm
• 发射波长（Em）：约 694 nm
• 摩尔消光系数：约 250,000 L·mol^-1·cm^-1
• 储存条件：-20°C避光干燥保存
• 稳定性：对光敏感，应避免长时间光照；在酸性条件下稳定，碱性条件下可能发生聚集

应用领域

• 生物标记：用于标记抗体、蛋白质、多肽、核酸等生物分子，适用于流式细胞术、免疫荧光、Western blot等检测。
• 活体成像：远红外荧光穿透组织深度较大，适用于小动物活体成像，如肿瘤靶向成像、血管成像、淋巴成像等。
• 细胞成像：用于细胞表面或细胞内特定结构的荧光标记与成像。
• 药物递送研究：作为荧光示踪剂，标记纳米载体或药物分子，研究其体内分布和代谢。
• 诊断试剂开发：用于制备荧光探针，应用于体外诊断和生物传感器。

实验方案建议

1. 储备液配制

• 推荐使用无水DMSO溶解产品，配制浓度为1-10 mM的储备液。
• 溶解后应充分混匀，避光保存，建议分装后于-20°C保存，避免反复冻融。

2. 生物分子标记（以抗体为例）

• 将抗体溶于pH 8.3-9.0的碳酸氢钠缓冲液中（避免使用含氨基的缓冲液如Tris）。
• 按染料与抗体摩尔比（通常为3-10）加入Cy5.5-甲基 羧酸储备液，室温避光反应1-2小时。
• 反应结束后，使用脱盐柱或透析去除游离染料，收集标记产物。
• 通过测定A₆₇₅和A₂₈₀计算标记度（DOL）。

3. 活体成像实验

• 将标记好的探针通过尾静脉注射入动物模型，使用远红外成像系统进行检测。
• 建议设置未标记对照组，以评估背景信号。
• 成像参数：激发滤光片675 nm，发射滤光片700-720 nm。

4. 细胞成像

• 将标记探针与细胞孵育（浓度需优化，通常1-10 μg/mL），37°C避光孵育30-60分钟。
• 用PBS洗涤后，使用荧光显微镜或共聚焦显微镜观察。

注意事项

• 操作时请佩戴手套，避免皮肤直接接触。
• 所有溶液建议现配现用，避免长时间光照。
• 标记反应需优化染料与蛋白的比例，以获得最佳信号背景比。

储存条件

• 未开封产品：-20°C避光干燥保存，有效期24个月。
• 溶解后：建议分装后于-20°C避光保存，避免反复冻融，有效期1个月。
• 运输条件：室温运输，避光防潮。
• 注意事项：避免暴露于强光下；保持干燥，防止吸潮。

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