DFHBI-1TDFHBI-1T

目录号: PL08577 纯度: ≥98%
DFHBI-1T 是一种可透过膜的 RNA 适配体激活的荧光探针 (ex/em=472 nm/507 nm)。DFHBI-1T 与 RNA 适配体 (Spinach, Spinach2, iSpinach, Broccoli) 结合并产生特定的荧光和较低的背景荧光。DFHBI-1T 可以用于活细胞中的 RNA 成像。
DFHBI-1T(CAS 1539318-36-9)产品图
CAS No. :1539318-36-9
商品编号 规格 价格 会员价 是否有货 数量
PL08577-5mg 5mg ¥988.00 请登录
PL08577-10mg 10mg ¥1545.00 请登录
PL08577-25mg 25mg ¥2845.00 请登录
PL08577-50mg 50mg ¥4465.00 请登录
PL08577-100mg 100mg ¥6243.00 请登录
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中文名称
DFHBI-1T
中文别名
(Z)-5-(3,5-二氟-4-羟基苯亚甲基)-2-甲基-3-(2,2,2-三氟乙基)-3,5-二氢-4H-咪唑-4-酮
英文名称
DFHBI-1T
英文别名
DFHBI 1T;DFHBI-1T;(5Z)-5-[(3,5-Difluoro-4-hydroxyphenyl)methylene]-3,5-dihydro-2-methyl-3-(2,2,2-trifluoroethyl)-4H-imidazol-4-one;(5z)-5-(3,5-Difluoro-4-Hydroxybenzylidene)-2-Methyl-3-(2,2,2-Trifluoroethyl)-3,5-Dihydro-4h-Imidazol-4-One;(Z)-5-(3,5-Difluoro-4-hydroxybenzylidene)-2-methyl-3-(2,2,2-trifluoroethyl)-3,5-dihydro-4H-imidazol-4-one;Q27453430;O=C1N(CC(F)(F)F)C(C)=N\\C1=C/C1=CC(F)=C(O)C(F)=C1;4-[(Z)-3,5-Difluoro-4-hydroxybenzylidene]
Cas No.
1539318-36-9
分子式
C13H9F5N2O2
分子量
320.21
包装储存
-20°C, protect from light In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)
产品详情
DFHBI-1T 是一种可透过膜的 RNA 适配体激活的荧光探针 (ex/em=472 nm/507 nm)。DFHBI-1T 与 RNA 适配体 (Spinach, Spinach2, iSpinach, Broccoli) 结合并产生特定的荧光和较低的背景荧光。DFHBI-1T 可以用于活细胞中的 RNA 成像。
生物活性
DFHBI-1T is a membrane-permeable RNA aptamers-activated fluorescence probe (ex/em=472 nm/507 nm). DFHBI-1T binds to RNA aptamers (Spinach, Spinach2, iSpinach, and Broccoli) and causes specific fluorescence and lower background fluorescence. DFHBI-1T is used to image RNA in live cells.
性状
Solid
体外研究(In Vitro)
DFHBI-1T (20 μM; for 10 min) increases fluorescence in COS7 cells expressing (CGG)60-Spinach2 over DFHBI (20 μM).
Broccoli-DFHBI-1T has ex/em=472 nm/507 nm and Spinach2-DFHBI-1T has ex/em=482 nm/505 nm.
has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.
运输条件
Room temperature in continental US; may vary elsewhere.
储存方式
-20°C, protect from light In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)
Emission(Em)
Em 495-570 nm Green
Excitation(Ex)
Ex 450-495 nm Blue
参考文献
[1]. Wenjiao Song, et al. Plug-and-play fluorophores extend the spectral properties of Spinach. J Am Chem Soc. 2014 Jan 29;136(4):1198-201.
[2]. Grigory S Filonov, et al. Broccoli: rapid selection of an RNA mimic of green fluorescent protein by fluorescence-based selection and directed evolution. J Am Chem Soc. 2014 Nov 19;136(46):16299-308.
溶解度数据
In Vitro: DMSO : 50 mg/mL (156.15 mM; Need ultrasonic)配制储备液
搜索质检报告(COA)
[1]. Wenjiao Song, et al. Plug-and-play fluorophores extend the spectral properties of Spinach. J Am Chem Soc. 2014 Jan 29;136(4):1198-201.
[2]. Grigory S Filonov, et al. Broccoli: rapid selection of an RNA mimic of green fluorescent protein by fluorescence-based selection and directed evolution. J Am Chem Soc. 2014 Nov 19;136(46):16299-308.

1:一般建议:溶解度为Medlife测试数据,可能与文献描述存在差异。这是由于生产工艺和批次不同产生的正常现象。为了使其更好的溶解,请用37℃加热试管并在超声波水浴中震动片刻。不同批次产品溶解度各有差异,仅做参考,具体以实验方案为准。

2:储存条件:粉末-20°C一般情况可以保存3年,溶于溶剂-80°C一般情况可以保存1年。不同产品及不同批次产品可能存在差异,请细致阅读产品信息,并辅助参考相关文献描述。

概述

DFHBI-1T(货号:PL08577,CAS号:1539318-36-9)是一种用于RNA成像的荧光探针,属于Spinach适配体结合染料家族。DFHBI-1T是DFHBI的衍生物,具有改善的细胞通透性和荧光性能。该染料在与Spinach2或Broccoli等RNA适配体结合后,荧光显著增强,适用于活细胞中RNA的实时成像和追踪。

理化性质

  • 化学名称:(Z)-4-(3,5-二氟-4-羟基亚苄基)-2-甲基-1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-咪唑-5(4H)-酮
  • 分子式:C13H9F5N2O2
  • 分子量:320.21 g/mol
  • 外观:黄色至橙色固体
  • 溶解性:可溶于DMSO(10 mM),微溶于水
  • 荧光特性:与RNA适配体结合后,最大激发波长~482 nm,最大发射波长~501 nm
  • 纯度:≥95% (HPLC)
  • 储存条件:-20°C避光干燥保存

应用领域

  • 活细胞RNA成像:与Spinach2、Broccoli等RNA适配体结合,用于实时监测RNA的定位、运输和降解。
  • RNA-蛋白质相互作用研究:通过荧光信号变化分析RNA与蛋白质的结合。
  • 基因表达研究:作为报告基因,检测特定RNA的表达水平。
  • 病毒RNA追踪:标记病毒RNA,研究其感染过程和细胞内动态。
  • 高通量筛选:用于筛选影响RNA稳定性或剪接的化合物。

实验方案建议

1. 储备液配制

  • 将DFHBI-1T溶于无水DMSO,配制成10 mM储备液,分装后-20°C避光保存,避免反复冻融。

2. 细胞染色

  • 对于活细胞成像,建议工作浓度为10-50 μM。将DFHBI-1T直接加入培养基中,孵育15-30分钟。
  • 染色缓冲液:可使用无血清培养基或HBSS(含钙镁),pH 7.4。
  • 孵育条件:37°C,5% CO2,避光。

3. 成像参数

  • 激发滤光片:~480/20 nm,发射滤光片:~510/20 nm。
  • 使用荧光显微镜或共聚焦显微镜,选择适当的物镜(如40x或63x油镜)。
  • 曝光时间根据信号强度调整,建议先进行预实验优化。

4. 对照设置

  • 阳性对照:使用已知表达Spinach2或Broccoli适配体的细胞。
  • 阴性对照:未转染适配体的细胞,用于评估背景荧光。

5. 注意事项

  • 染料对光敏感,操作时尽量避免强光照射。
  • 染色后需用新鲜培养基或缓冲液洗涤1-2次,以降低背景。
  • 若背景较高,可尝试降低染料浓度或缩短孵育时间。
  • 染料可能对某些细胞有毒性,建议进行浓度梯度预实验。

储存条件

  • 粉末:-20°C避光干燥保存,有效期2年。
  • 储备液:-20°C避光保存,建议分装,避免反复冻融,有效期6个月。
  • 运输条件:室温运输,避光防潮。

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  • Spinach2适配体表达质粒(货号:PL12346):用于表达Spinach2 RNA适配体。
  • Hoechst 33342(货号:PL00001):细胞核染料,用于复染。
  • DMSO(货号:PL00002):细胞培养级,用于配制储备液。
Q1:DFHBI-1T 和普通的 DFHBI 有什么区别?为什么文献里更推荐用 DFHBI-1T 做活细胞 RNA 成像?

DFHBI-1T 是 DFHBI 的衍生物,主要改进在于细胞通透性和与 RNA 适配体结合后的荧光性能。与 DFHBI 相比,DFHBI-1T 在活细胞中更容易进入细胞并与 Spinach2 或 Broccoli 等适配体结合,从而产生更强的荧光信号。具体的光谱参数(激发约 482 nm,发射约 501 nm)和化学结构信息可查阅产品说明书。若需对比两种染料在特定细胞类型中的表现,建议参考相关文献或联系技术支持获取应用案例。

Q2:DFHBI-1T 能用培养基或水直接溶解吗?配储备液时有什么注意事项?

DFHBI-1T 微溶于水,不能直接用培养基或水配制成高浓度储备液。建议先用无水 DMSO 配制成 10 mM 储备液,分装后 -20°C 避光保存。配制时确保 DMSO 无水,避免反复冻融导致染料降解。工作液可用无血清培养基或 HBSS 稀释储备液至所需浓度,现配现用。具体稀释比例需根据实验体系优化,可参考说明书或联系技术支持。

Q3:DFHBI-1T 的 DMSO 储备液在 -20°C 能保存多久?反复冻融会影响荧光性能吗?

根据产品资料,DFHBI-1T 的 DMSO 储备液在 -20°C 避光保存的有效期约为 6 个月。反复冻融可能导致染料降解或荧光性能下降,因此建议将储备液分装成单次使用的小份,避免反复冻融。粉末形式在 -20°C 避光干燥条件下可保存 2 年。若储备液出现明显颜色变化或荧光减弱,建议重新配制。具体稳定性数据可参考批次 COA 或联系技术支持确认。

Q4:DFHBI-1T 的纯度是怎么检测的?如何获取批次的质量检验报告?

DFHBI-1T 的纯度通常采用 HPLC 检测,产品资料标明纯度 ≥95%。每批产品均经过质检,具体质检项目(如 HPLC 图谱、核磁共振、质谱等)可能因批次而异。您可以通过产品货号 PL08577 向供应商索取批次对应的 COA(质量检验报告),或联系技术支持获取详细的质检数据。若对特定批次的纯度有疑问,建议直接核对 COA 中的检测结果。

Q5:用 DFHBI-1T 做活细胞 RNA 成像时,工作浓度和孵育时间怎么确定?背景太高怎么办?

对于活细胞成像,DFHBI-1T 的建议工作浓度为 10–50 μM,孵育 15–30 分钟(37°C,5% CO2,避光)。但不同细胞类型和适配体表达水平可能影响最佳条件,建议先进行浓度梯度预实验。若背景较高,可尝试降低染料浓度、缩短孵育时间,并在染色后用新鲜培养基或缓冲液洗涤 1–2 次。同时设置未转染适配体的阴性对照以评估背景荧光。具体优化方案可参考说明书或联系技术支持。

Q6:DFHBI-1T 能否用于固定细胞或组织切片的 RNA 成像?与活细胞成像相比有什么不同?

DFHBI-1T 主要设计用于活细胞中 RNA 适配体的实时成像,其细胞通透性和荧光激活机制在活细胞体系中表现较好。对于固定细胞或组织切片,染料的可及性和适配体结构可能受影响,导致信号减弱或背景升高。目前产品资料未提供固定细胞或组织切片的验证数据,建议先进行预实验评估可行性,或联系技术支持获取相关应用建议。若需固定样品成像,可考虑优化固定和透化条件。

Q7:DFHBI-1T 在运输过程中需要低温吗?收到产品后应该如何检查和处理?

DFHBI-1T 在运输条件下可室温运输,但需避光防潮。收到产品后,应检查包装是否完好、避光措施是否到位,并核对产品标签与货号(PL08577)是否一致。粉末建议立即置于 -20°C 避光干燥保存;若需配制储备液,请使用无水 DMSO 并分装冻存。若发现包装破损或产品外观异常,请及时联系供应商。具体运输和验收要求可参考产品说明书或联系技术支持。

Q8:DFHBI-1T 对操作人员有毒性风险吗?实验时应该采取哪些防护措施?

DFHBI-1T 属于科研用荧光染料,目前缺乏系统的毒性数据,建议按实验室化学品安全规范操作。配制和染色时需佩戴手套、实验服和护目镜,避免直接接触皮肤和吸入粉末。染料对光敏感,操作时注意避光。废液应按当地法规作为化学废物处理,不可直接排入下水道。若需更详细的安全信息,可索取产品的安全数据表(SDS)或联系技术支持。

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The molarity calculator equation
Mass (g) = Concentration (mol/L) × Volume (L) × Molecular Weight (g/mol)
The dilution calculator equation
Concentration (start) × Volume (start) = Concentration (final) × Volume (final)
This equation is commonly abbreviated as: C1V1 = C2V2