PI/RNase即用型染色液,即 PI/RNase Staining Solution (Ready to Use)、 Propidium Iodide (PI)/RNase Staining Solution (Ready to Use)或碘化丙啶/核糖核酸酶即用型染色液,是一种快速、高效、便捷的基于RNase去除RNA,PI与DNA特异性结合,从而可以对细胞周期与细胞凋亡进行流式细胞仪分析检测的即用型染色液。本染色液为即用型,且染色后无须洗涤。本产品可以使用流式细胞仪、荧光显微镜以及荧光酶标仪等荧光检测系统进行分析和检测。
碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一种非细胞膜渗透性荧光染料,不能穿过具有生物活性的细胞膜,只能通过细胞膜的破损处到达细胞核内,因此对于具有完整细胞膜的正常细胞或凋亡细胞不能染色。而对于坏死细胞,其细胞膜的完整性丧失,PI可进入细胞核并与双链DNA结合,从而可以产生红色荧光,这种结合很少或几乎没有序列偏好,每4-5个碱基对插入一个PI分子。
PI的分子式为C27H34I2N4,分子质量为668.39,CAS number为25535-16-4。形成DNA复合物的最大激发光波长为535nm,最大发射光波长为617nm。
细胞周期(Cell cycle)是指连续分裂细胞从一次有丝分裂结束到下一次有丝分裂结束所经历的整个过程,所需的时间称为细胞周期时间。细胞周期又可以分为间期(Interphase)和有丝分裂期(M phase),细胞间期通常又划分为休眠期(G0)、DNA合成前期(G1)、DNA合成期(S)、DNA合成后期(G2)。DNA周期检测可用来反应细胞周期的各期的状况,常用于细胞增殖和肿瘤研究。
碘化丙啶染色后,假设G0/G1期细胞的荧光强度为1,那么含有双份基因组DNA的G2/M期细胞的荧光强度的理论值为2,正在进行DNA复制的S期细胞的荧光强度为1-2之间。凋亡细胞由于细胞核发生浓缩以及发生DNA片段化(DNA fragmentation)导致部分基因组DNA片段在染色过程中丢失,因此凋亡细胞碘化丙啶染色后呈现明显的弱染,即荧光强度小于1,在流式检测的荧光图上出现Sub-G1峰,即凋亡细胞峰。
细胞周期(Cell cycle)是指连续分裂细胞从一次有丝分裂结束到下一次有丝分裂结束所经历的整个过程,所需的时间称为细胞周期时间。细胞周期又可以分为间期(Interphase)和有丝分裂期(M phase),细胞间期通常又划分为休眠期(G0)、DNA合成前期(G1)、DNA合成期(S)、DNA合成后期(G2)。DNA周期检测可用来反应细胞周期的各期的状况,常用于细胞增殖和肿瘤研究。
碘化丙啶染色后,假设G0/G1期细胞的荧光强度为1,那么含有双份基因组DNA的G2/M期细胞的荧光强度的理论值为2,正在进行DNA复制的S期细胞的荧光强度为1-2之间。凋亡细胞由于细胞核发生浓缩以及发生DNA片段化(DNA fragmentation)导致部分基因组DNA片段在染色过程中丢失,因此凋亡细胞碘化丙啶染色后呈现明显的弱染,即荧光强度小于1,在流式检测的荧光图上出现Sub-G1峰,即凋亡细胞峰。