Hoechst 33342染色液(Hoechst 33342 Staining Solution),也称3D细胞核染色液(3D Cell Nuclear Staining Solution),是一种快速、便捷的用于3D培养的细胞球或类器官等的细胞核染色的溶液。仅需染色10分钟就可在荧光显微镜下观察到非常明亮的细胞核蓝色荧光染色。如果细胞球或类器官中有凋亡细胞,其细胞核会呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。本产品不仅可以用于常规的细胞核染色,也能用于监测细胞凋亡等细胞核异常现象。
Hoechst 33342,也称bisBenzimide H 33342或HOE 33342。分子式为C27H28N6O·3HCl·3H2O,分子量为615.99,CAS Number 23491-52-3。Hoechst 33342的最大激发波长为346nm,最大发射波长为460nm;Hoechst 33342和双链DNA结合后,最大激发波长为350nm,最大发射波长为461nm。
Hoechst 33342是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低。常用于细胞凋亡检测、普通的细胞核染色或常规的DNA染色。
本产品适用范围广。本产品可用于各种方法培养出的3D细胞球或类器官,包括超低吸附细胞培养板、Matrix-Gel™基质胶或Matrigel包被的平板、琼脂糖包被的平板、细胞悬滴培养板等。不仅可以用于常规的细胞核荧光染色,也能用于检测细胞凋亡。
本产品使用便捷,整个实验过程仅需约10-30分钟即可完成。对于常规的3D细胞活细胞染色,仅需加入本产品避光孵育10分钟即可进行荧光检测,也可以固定后再加入本产品进行染色。本产品固定后染色效果优于活细胞直接染色效果。
传统的细胞培养大多以二维(Two-dimensional, 2D)的形式展开,但2D培养的细胞在生长方式、生长形态、分化和功能等方面都与体内生理条件下细胞的真实形态和结构存在明显差异,可能会因为细胞结构和组织形态的缺失,使实验结果的可信度降低[1-3]。三维(Three-dimensional, 3D)细胞培养能够更好地模拟体内细胞生存的微环境,更能代表体内组织,也能更真实的反应细胞与细胞间、细胞与基质间的相互作用,细胞对外源性和内源性刺激的应答也更接近于它们在体内的反应,3D细胞培养从而成为更有价值并更为可信的体外实验模型,能够获得与体内实验更加一致的实验结果[4-5]。
3D肿瘤细胞模型越来越多地被用于了解疾病机制和药物研发。2D培养的肿瘤细胞,其单侧细胞膜可以均匀地获得营养和氧气,而3D培养的肿瘤细胞团的内部细胞获得营养和氧气的机会更少,形成自然的营养和氧气梯度,能更好地模拟体内微环境条件,因此3D培养的肿瘤球状体(Spheroid)或肿瘤类器官(Organoid)等能更好地模拟体内肿瘤,更利于小分子药物筛选或者肿瘤相关分子机制的研究,也更能准确地预测药物治疗的体内反应、疗效或毒性。同时,2D肿瘤细胞模型体外扩增有一定局限性,在传代后容易丧失原肿瘤的遗传异质性,出现优势克隆选择性,从而降低临床相关性。相比于2D细胞模型,3D细胞球或者类器官很多情况下能提供更可信的研究结果,简化并加速药物评价流程。自2009年小肠类器官首次建立至今,3D细胞和类器官研究已经扩展到很多组织系统,并成为生命科学最热门的领域之一。
按照96孔板每孔100μl Beyo3D™ Hoechst 33342染色液,本产品每10ml包装可以进行100个样品的检测。