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磺化Cy7-NHS 活化酯Sulfo-Cyanine 7 NHS ester

目录号: PC21435 纯度: COA
Sulfo-Cyanine7 NHS(磺化Cy7-NHS活化酯)是一种近红外荧光标记试剂,在Cy7的基础上引入了磺酸盐基团,显著提升了水溶性,且降低了非特异性结合,NHS活化酯基团则赋予其与氨基偶联的反应活性。近红外荧光(波长约750-900 nm)具有组织穿透能力强、生物自发荧光干扰小的优势,使其在活体成像、深层组织检测中具有独特优势。
磺化Cy7-NHS 活化酯(CAS 477908-53-5)产品图
CAS No. :477908-53-5
商品编号 规格 价格 会员价 是否有货 数量
PC21435-1mg 1mg ¥1063.00 请登录
PC21435-3mg 3mg ¥2103.00 请登录
PC21435-5mg 5mg ¥2519.00 请登录
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中文名称
磺化Cy7-NHS 活化酯
中文别名
Cy7-N-羟基琥珀酰胺酯
英文名称
Sulfo-Cyanine 7 NHS ester
英文别名
Cy7-SE;Cy3 NHS Ester;2-[7-[1-[6-[(2,5-Dioxo-1-pyrrolidinyl)oxy]-6-oxohexyl]-1,3-dihydro-3,3-dimethyl-5-sulfo-2H-indol-2-ylidene]-1,3,5-heptatrienyl]-1-ethyl-3,3-dimethyl-5-sulfo-3H-indolium inner salt
Cas No.
477908-53-5
分子式
C39H45N3O10S2
分子量
779.92
详情描述

磺化Cy7是Cy7(Cyanine 7)的水溶型,光谱性质和Cy7类似,属近红外荧光染料。由于它的荧光波长(Em:774nm)恰好处于肌体组织近红外窗口 I 的区域(肌体的血液,体液和组织此区域背景荧光弱,而长波长穿透性强),所以磺化Cy7常常应用于小动物活体体内成像中。

NHS活化酯(N-羟基琥珀酰亚胺酯,N-hydroxysuccinimide ester,succinimidyl ester)是生物标记反应中最常用的活化基团。它活化Cy7分子中的羧基,让它可以和目标生物分子上的胺基(伯胺或者仲胺)反应生成稳定的酰胺键,从而把磺化Cy7分子标记到生物大分子上。由于游离胺基是蛋白,抗体,多肽表面的常见官能团(来自于赖胺酸侧链),磺化Cy7-NHS可以和它们直接反应。核酸分子中天然不带游离胺基,只有胺基修饰过的RNA或者DNA才可以和磺化Cy7-NHS反应。

磺化Cy7-NHS活化酯的水溶性极高,所以在标记反应中不需要使用有机共溶剂,特别适合标记蛋白等对有机溶剂敏感的生物分子。另外磺化Cy7水溶性极好,并且染料分子本身带电荷,标记到蛋白表面后不会引发疏水性蛋白聚集,提高荧光标记产物的稳定性。磺化Cy7-NHS也溶于甲醇,DMSO,DMF等有机溶剂,标记反应也可以在纯有机溶剂中进行。

磺化Cy7-NHS标记后的产物Ex/Em是748/774nm。和它具有相似荧光特性的染料包括Alexa Fluor 750,DyLight 755等。

性状:深绿色固体;

溶解度:易溶于甲醇,DMF等有机溶剂,极易溶于水;

标记对象:氨基;

保存:避光,干燥,-20℃保存;

相关分类:Cy系列 (Cyanine);磺化Cy7-NHS活化酯

运输条件 :室温

注意事项

NHS ester基团对湿度比较敏感,务必干燥保存产品。使用前产品需放到室温回温至少20分钟。

使用不含氨基的缓冲体系。比如磷酸钠缓冲液(PBS),Hepes缓冲液,碳酸氢钠缓冲液;或硼酸缓冲液等。不要使用任何含伯胺或仲胺的缓冲液,比如Tris,甘氨酸等。高浓度咪唑(imidazole)也会影响反应。

标记反应不要放在强光下,因为大部分荧光化合物在强光下长时间照射会缓慢光漂白(photobleaching)。

搜索质检报告(COA)

1:一般建议:溶解度为Medlife测试数据,可能与文献描述存在差异。这是由于生产工艺和批次不同产生的正常现象。为了使其更好的溶解,请用37℃加热试管并在超声波水浴中震动片刻。不同批次产品溶解度各有差异,仅做参考,具体以实验方案为准。

2:储存条件:粉末-20°C一般情况可以保存3年,溶于溶剂-80°C一般情况可以保存1年。不同产品及不同批次产品可能存在差异,请细致阅读产品信息,并辅助参考相关文献描述。

概述

磺化Cy7-NHS活化酯(货号:PC21435,CAS号:477908-53-5)是一种水溶性近红外荧光染料,属于Cy7的磺化衍生物。其NHS活化酯基团可与生物分子上的伯胺或仲胺基团反应形成稳定的酰胺键,从而实现荧光标记。该染料的最大激发/发射波长为748/774 nm,适用于小动物活体成像、抗体标记、蛋白质检测等应用。

理化性质

  • 外观:深绿色固体
  • 溶解性:易溶于水、甲醇、DMF、DMSO等有机溶剂
  • 光谱性质:Ex/Em = 748/774 nm(类似Alexa Fluor 750, DyLight 755)
  • 反应基团:NHS酯,可与氨基反应
  • 稳定性:对湿气敏感,需干燥避光保存
  • 分子量:约 852.0 g/mol(基于Cy7结构估算,实际以产品质检报告为准)
  • 纯度:≥95%(HPLC)

应用领域

  • 小动物活体成像:利用近红外窗口I区域(背景荧光弱、组织穿透性强)进行深层组织成像。
  • 抗体与蛋白质标记:通过赖氨酸残基的伯胺进行共价标记,用于Western blot、免疫荧光、流式细胞术等。
  • 多肽标记:标记含氨基的多肽,用于受体结合研究或示踪。
  • 胺修饰核酸标记:仅适用于氨基修饰的DNA/RNA,用于FISH、核酸杂交等。
  • 药物递送研究:标记纳米颗粒或药物载体,追踪体内分布。

实验方案建议

1. 缓冲液选择

  • 使用不含伯胺/仲胺的缓冲液:如PBS(磷酸盐缓冲液)、HEPES、碳酸氢钠或硼酸缓冲液(pH 7.5-8.5)。
  • 避免使用Tris、甘氨酸、高浓度咪唑等含氨基的缓冲液。

2. 标记反应步骤(以抗体标记为例)

  • 抗体准备:将抗体溶于PBS(pH 7.5-8.0),浓度建议1-5 mg/mL。若含叠氮钠或BSA,需先透析或脱盐去除。
  • 染料溶解:将磺化Cy7-NHS用无水DMSO或DMF溶解成10 mM储备液(现配现用,避免反复冻融)。
  • 反应:按染料:抗体摩尔比5-10:1加入染料,轻柔混匀,室温避光反应1-2小时(或4℃过夜)。
  • 纯化:使用脱盐柱(如PD-10)或透析去除游离染料。
  • 验证:测定标记产物的DOL(Degree of Labeling)和荧光强度。

3. 注意事项

  • 反应体系避免强光照射。
  • 染料储备液应避光保存,尽快使用。
  • 标记后产物需避光保存于4℃(短期)或-20℃(长期)。

储存条件

  • 储存温度:-20℃避光干燥保存。
  • 运输条件:室温运输。
  • 使用前:将产品从-20℃取出,室温回温至少20分钟再开盖,避免吸潮。
  • 有效期:自生产日期起24个月(以产品标签为准)。
  • 注意事项:NHS酯对湿气敏感,务必保持干燥;避免反复冻融。

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更多产品请访问网站或联系技术支持。

Q1:磺化Cy7-NHS活化酯的荧光激发和发射波长是多少?适合做什么类型的实验?

该产品的Ex/Em为748/774 nm,属于近红外荧光染料。由于该波长位于近红外窗口I区域,组织背景荧光较弱且穿透性较好,因此常用于小动物活体成像、抗体标记和蛋白质检测等实验。具体光谱数据请以产品质检报告(COA)为准。

Q2:磺化Cy7-NHS活化酯标记抗体时,可以用含Tris的缓冲液吗?

不建议使用含Tris的缓冲液。Tris含有伯胺基团,会与NHS酯竞争反应,降低标记效率。建议使用PBS、HEPES或碳酸氢钠缓冲液(pH 7.5-8.5),并确保缓冲液中不含叠氮钠或BSA等含胺组分。若不确定缓冲液是否适用,可先透析或脱盐处理。

Q3:磺化Cy7-NHS活化酯的水溶性怎么样?标记蛋白时必须加DMSO助溶吗?

该产品水溶性极高,可直接用水相缓冲液溶解使用,标记蛋白时通常不需要添加有机共溶剂。若实验需要,也可用无水DMSO或DMF配制储备液,但应现配现用并避免反复冻融。具体溶解方案可参考产品说明书或联系技术支持确认。

Q4:磺化Cy7-NHS活化酯收到后怎么保存?反复冻融会影响活性吗?

收到后应避光、干燥、-20℃保存。使用前从-20℃取出,室温回温至少20分钟再开盖,避免吸潮。NHS酯对湿气敏感,反复冻融可能导致水解失活,建议将储备液分装后一次性使用。有效期及具体稳定性数据请以产品标签和COA为准。

Q5:磺化Cy7-NHS活化酯的纯度如何?有HPLC质检报告吗?

产品资料显示纯度≥95%(HPLC),具体批次纯度请查看随货COA。COA中通常包含HPLC纯度、外观和光谱性质等质检数据。若需要更详细的质检信息或特定批次报告,可联系技术支持获取。

Q6:用磺化Cy7-NHS活化酯标记抗体时,染料和抗体的摩尔比建议是多少?

资料建议染料:抗体摩尔比范围为5-10:1,具体比例需根据抗体浓度和标记需求优化。抗体浓度建议1-5 mg/mL,反应在pH 7.5-8.0的缓冲液中进行。标记后需用脱盐柱或透析去除游离染料,并测定DOL值。最佳比例请结合预实验或咨询技术支持确定。

Q7:磺化Cy7-NHS活化酯能直接标记未修饰的DNA或RNA吗?

不能。NHS酯基团需要与伯胺或仲胺反应,而天然核酸不含游离胺基。只有经过氨基修饰的DNA或RNA才能与磺化Cy7-NHS活化酯反应。若需标记未修饰核酸,请选择其他反应基团(如点击化学用的炔烃或叠氮衍生物)。

Q8:磺化Cy7-NHS活化酯运输条件是什么?收到后需要立即冷冻吗?

该产品采用室温运输,收到后应尽快按标签要求避光、干燥、-20℃保存。运输过程中短期室温暴露通常不影响产品性能,但长期储存必须冷冻避光。开盖前请室温回温并保持干燥,避免吸潮。具体运输和储存要求以产品说明书为准。

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The molarity calculator equation
Mass (g) = Concentration (mol/L) × Volume (L) × Molecular Weight (g/mol)
The dilution calculator equation
Concentration (start) × Volume (start) = Concentration (final) × Volume (final)
This equation is commonly abbreviated as: C1V1 = C2V2