磺酸基-Cy7-甲基 羧酸（近红外）Sulfo-Cy7-M Free Acid (NIR)

概述

磺酸基-Cy7-甲基羧酸（近红外）是一种磺化花菁染料，属于Cy7衍生物，具有近红外荧光特性。其最大吸收波长约为747 nm，最大发射波长约为774 nm，处于近红外光学窗口，适用于生物成像和检测。该染料含有磺酸基团，提高了水溶性和生物相容性，并带有甲基羧酸基团，可用于进一步偶联修饰。

理化性质

• 外观：深绿色至深蓝色固体粉末
• 分子式：C₃₄H₄₂N₂O₈S₂（基于典型结构，实际以COA为准）
• 分子量：约670.8 g/mol
• 溶解性：易溶于水、甲醇、DMSO、DMF等极性溶剂
• 最大吸收波长（λ_ex）：~747 nm（水中）
• 最大发射波长（λ_em）：~774 nm（水中）
• 荧光量子产率：高（具体值因溶剂而异）
• 储存条件：避光、干燥、-20°C保存
• 稳定性：对光敏感，应避免长时间光照；在酸性条件下可能发生质子化影响荧光

应用领域

• 生物成像：近红外荧光成像，适用于活体小动物成像、深层组织成像。
• 细胞标记：用于细胞膜或细胞内标记，进行荧光显微镜观察。
• 分子探针：通过羧基偶联抗体、多肽、核酸等生物分子，构建靶向荧光探针。
• 流式细胞术：近红外通道检测，减少自发荧光干扰。
• 药物递送研究：标记纳米载体或药物，追踪体内分布。
• 免疫荧光：用于组织切片或细胞样本的免疫荧光染色。

实验方案建议

1. 染料储备液配制

• 推荐使用无水DMSO或DMF配制储备液，浓度通常为1-10 mM。
• 溶解后充分混匀，避免剧烈涡旋产生气泡。
• 储备液可分装避光保存于-20°C，避免反复冻融。

2. 标记生物分子（以抗体为例）

• 将抗体溶于pH 8.3-8.5的碳酸氢钠缓冲液（0.1 M）中，浓度建议1-2 mg/mL。
• 按染料:抗体摩尔比（通常5-10:1）加入染料储备液，轻柔混匀。
• 室温避光反应1-2小时。
• 使用脱盐柱或透析去除游离染料，可通过测定A747/A280评估标记度。

3. 细胞成像实验

• 将染料稀释至工作浓度（如1-10 μM）于无血清培养基或PBS中。
• 细胞孵育30-60分钟（37°C，5% CO₂）。
• 用PBS洗涤3次，去除未结合染料。
• 使用近红外荧光显微镜或成像系统观察（激发/发射滤光片：740-760 nm/770-800 nm）。

4. 活体成像

• 通过尾静脉注射标记探针（剂量根据模型优化，通常1-10 nmol/只小鼠）。
• 使用活体成像系统，设置激发波长745 nm，发射收集波段780-820 nm。
• 注意避光操作，减少背景信号。

5. 注意事项

• 染料对光敏感，所有操作尽量在避光条件下进行。
• 避免使用含伯胺的缓冲液（如Tris）进行标记反应，以免竞争性结合。
• 淬灭剂：避免与强氧化剂接触。

储存条件

• 短期储存：2-8°C避光干燥保存，可稳定数月。
• 长期储存：-20°C避光干燥保存，建议充氩气或氮气以延长保质期。
• 溶液储存：储备液应分装避光保存于-20°C，避免反复冻融，建议6个月内使用。
• 运输条件：室温运输，避光防潮。
• 注意事项：避免接触强酸、强碱和氧化剂；避免长时间暴露于光照下。

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