Mito-Tracker Red CMXRos (线粒体红色荧光探针),也称MitoTracker Red CMXRos,是一种具有细胞通透性的X-rosamine衍生物(Chloromethyl-X-rosamine,简称CMXRos),能够特异性地标记细胞中具有生物活性的线粒体,检测线粒体膜电位。本产品为高纯度探针,兼容后续的细胞固定和通透,但染色后再固定和通透,荧光强度会有一定程度的下降。
本产品是一种氧化型的红色荧光染料,只需简单地和细胞孵育,即可通过被动运输穿过细胞膜,并借助本探针含有的弱巯基反应性的氯甲基(mildly thiol-reactive chloromethyl)官能团特异性地标记有生物活性的线粒体。本探针含有的弱巯基反应性的氯甲基,可以和线粒体内蛋白的巯基反应并共价连接,因此后续实验使用多聚甲醛或甲醛等醛类固定剂,以及细胞通透的去垢剂Triton X-100等处理时,线粒体的荧光标记不会消失,但可能会有一定程度的下降(约下降2-10倍)。由于本荧光探针的激发光谱和发射光谱与常见的绿色荧光探针重叠较少,因此非常适合用于荧光双标实验。
Mito-Tracker Red CMXRos分子式为C32H32Cl2N2O,分子量为531.5,CAS number为167095-09-2,Mito-Tracker Red CMXRos呈红色荧光,最大激发波长为579nm,最大发射波长为599nm。
Mito-Tracker Red CMXRos可以用作线粒体特异性的荧光探针。和Rhodamine 123或JC-1相似,Mito-Tracker Red CMXRos对于线粒体的染色依赖于线粒体膜电位,因此该探针只能对活的细胞或组织进行染色,不能对固定或通透后的细胞或组织进行染色。
由于Mito-Tracker Red CMXRos在线粒体内的聚集依赖于线粒体的膜电位,因此本产品也可以作为线粒体膜电位的指示探针,通过检测线粒体膜电位的变化来检测细胞凋亡。
本产品为DMSO溶液,浓度为1µg/µl,约1.88mM。按最终工作浓度为50-200nM计算,本产品每50µg可以配制约500-2000ml Mito-Tracker Red CMXRos工作液。