细胞膜红色荧光染色试剂盒(DiI)

目录号: PC22437 纯度: N/A
细胞膜红色荧光染色试剂盒(DiI),Cell Plasma Membrane Staining Kit with DiI (Red Fluorescence)是一种以DiI为荧光探针,并提供了染色增强剂、能快速灵敏地对细胞膜进行红色荧光染色标记的试剂盒。
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细胞膜红色荧光染色试剂盒(DiI)
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细胞膜红色荧光染色试剂盒(DiI),Cell Plasma Membrane Staining Kit with DiI (Red Fluorescence)是一种以DiI为荧光探针,并提供了染色增强剂、能快速灵敏地对细胞膜进行红色荧光染色标记的试剂盒。

DiI即DiIC18(3),全称为1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'-tetramethylindocarbocyanine perchlorate,分子式为C59H97ClN2O4,分子量为933.88,CAS号为41085-99-8,是最常用的细胞膜荧光探针之一,呈现橙红色荧光。DiI是一种亲脂性羰花青(carbocyanine)染料,具有很长的亲脂性烃链,进入细胞膜后可以侧向扩散逐渐使整个细胞的细胞膜被染色,染色后非常稳定。

DiI在进入细胞膜之前荧光非常弱,仅当进入到细胞膜后才可以被激发出很强的荧光。DiI被激发后可以发出橙红色的荧光,DiI和磷酯双层膜结合后的激发光谱和发射光谱参考说明书。其中,最大激发波长为549nm,最大发射波长为565nm。

DiI被广泛用于正向或逆向的、活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂或长期示踪剂(long-term tracer)。DiI毒性很低,通常不会影响细胞的生存力(viability)。被DiI标记的神经细胞在体外培养的条件下可以存活长达4周,在体内可以长达一年。DiI在经过固定的神经元细胞膜上的迁移速率为0.2-0.6mm/day,在活的神经元细胞膜上的迁移速率为6mm/day。

本试剂盒提供了染色增强剂,使细胞膜染色更加快速,荧光染色更加明亮,染色背景更低。

本试剂盒除了最简单的细胞膜荧光标记外,还可以用于检测细胞的融合和粘附,检测发育或移植过程中细胞迁移,通过FRAP (Fluorescence Recovery After Photobleaching)检测脂在细胞膜上的扩散,检测细胞毒性和标记脂蛋白等。

本试剂盒可以直接染色活的细胞或组织,染色时间通常为5-20分钟。对于固定的细胞或组织,通常宜使用配制在PBS中的4%多聚甲醛进行固定,使用其它不适当的固定液会导致荧光背景较高。

DiI染色后可以兼容免疫荧光实验。建议使用免疫染色通透液或使用洋地黄皂苷配制的不会溶解细胞膜的通透液进行通透,其它去垢剂配制的通透液可能会溶解细胞膜上的脂类物质,造成DiI失去结合位置,最终导致DiI的染色失效。但通透也可能会影响DiI在细胞膜上的定位并会增加细胞内的染色,具体实验中需根据实验的需求选择合适的细胞通透液。

本试剂盒小包装C1991S,如果用于流式细胞仪,每个样品的检测体系体积为0.5ml时,可以进行200次检测;96孔板每孔检测体系的体积为100μl时可以进行1000次检测。

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The molarity calculator equation
Mass (g) = Concentration (mol/L) × Volume (L) × Molecular Weight (g/mol)
The dilution calculator equation
Concentration (start) × Volume (start) = Concentration (final) × Volume (final)
This equation is commonly abbreviated as: C1V1 = C2V2