细胞膜红色荧光染色试剂盒(PKH26),即Cell Plasma Membrane Red Fluorescence Staining Kit with PKH26,是一种以PKH26为荧光探针,并提供了染色增强剂、能快速灵敏地对细胞膜进行红色荧光染色和标记的试剂盒。
PKH26是一种新型的可用于细胞膜、外泌体标记和示踪的荧光探针,分子式为C59H97IN2,分子量为961.32,CAS号为154214-55-8,呈现红色荧光。PKH26结构上带有较长的脂肪族碳尾(Carbon tails),能稳定插入细胞膜、外泌体膜等的脂质区域。PKH26荧光背景低,脂溶性高,荧光染色效果依赖于细胞与膜的类型,主要用于细胞体外标记、体外细胞增殖研究以及长期的体内外细胞示踪研究。PKH26具有较长的体内半衰期,超过100天,有利于长期的体内研究。因此PKH26非常适合用于示踪研究,也适合用于细胞增殖研究和其它长期实验。PKH26与其它绿色PKH探针互补,在混合细胞群里能定量分析,且不会受PKH2、PKH67或FITC标记的影响。
PKH26可以稳定地与细胞膜脂质区结合并呈现明亮的红色荧光。荧光处于黄-橙色光谱区间。其中,最大激发波长为551nm,最大发射波长为567nm。
本试剂盒除了细胞膜荧光标记外,还可以用于细胞增殖分析以及鉴定正常或肿瘤组织中静止或缓慢分裂的干细胞或祖细胞。PKH26也被用于监测外泌体、病毒、血小板和其它纳米颗粒的摄取,干细胞分裂过程中膜的分配,细胞之间的膜转移,细胞吞噬作用,抗原递呈,粘附,通过间隙连接的信号传递,以及组织切片中的神经元迁移。由于其极其稳定的荧光,PKH26通常是体内细胞示踪研究中细胞荧光染料的优选,特别是标记的细胞研究周期超过一周的检测。
本试剂盒提供的Assay Buffer与哺乳动物细胞等渗,且不含去垢剂。在生理pH范围内,PKH26荧光强度通常不受染料定位模式的影响,因此不影响染色效果。但为避免影响细胞活力,不宜将细胞暴露在染色稀释液中过长时间。
本试剂盒提供了Staining Enhancer,使细胞膜染色更加快速,荧光染色更加明亮,染色背景更低。
本试剂盒可以直接染色活的细胞或组织的细胞膜,染色时间通常为5-20分钟。对于固定的细胞或组织,通常宜使用配制在PBS中的4%多聚甲醛固定液进行固定,使用其它固定液可能会导致荧光背景较高。
96孔板每孔检测体系的总体积为100μl时,或每个流式细胞检测的细胞数为100万时,本试剂盒小包装、中包装和大包装分别可以进行50次、250次和1000次检测。