生物素-4-荧光素（绿色）Biotin-4-Fluorescein (Green)

概述

生物素-4-荧光素（绿色）（Biotin-4-Fluorescein，货号PR01493，CAS号1032732-74-3）是一种荧光标记的生物素衍生物，将生物素与荧光素（FITC）通过4个原子的间隔臂连接。该产品结合了生物素与亲和素/链霉亲和素之间的高亲和力（Kd ~10^-15 M）和荧光素的高亮度绿色荧光（激发/发射波长约为494/520 nm），广泛应用于生物检测和成像领域。其间隔臂设计减少了空间位阻，提高了结合效率。

理化性质

• 化学名称：生物素-4-荧光素（绿色）
• CAS号：1032732-74-3
• 分子式：C₃₁H₃₂N₄O₇S（基于典型结构推断）
• 分子量：约620.67 g/mol
• 外观：黄色至橙色固体
• 溶解性：易溶于DMSO、DMF等有机溶剂，微溶于水
• 荧光特性：激发波长（Ex）~494 nm，发射波长（Em）~520 nm（绿色荧光）
• 纯度：≥95%（HPLC）
• 储存条件：-20°C避光干燥保存
• 稳定性：避免反复冻融，避免光照和潮湿

应用领域

• 荧光免疫分析：用于检测生物素化抗体或抗原，通过荧光信号定量。
• 细胞成像：标记亲和素/链霉亲和素，用于细胞表面或细胞内靶标的荧光成像。
• 流式细胞术：检测生物素化细胞表面标记物。
• 蛋白质印迹：作为荧光检测试剂，替代传统显色方法。
• 原位杂交：用于检测生物素化核酸探针。
• 微阵列分析：用于生物素化样品的荧光检测。

实验方案建议

1. 储备液配制

• 推荐使用DMSO溶解，配制1-10 mM储备液，分装后-20°C避光保存。
• 使用前用适当缓冲液（如PBS，pH 7.4）稀释至工作浓度。

2. 荧光标记亲和素/链霉亲和素

• 将生物素-4-荧光素与亲和素/链霉亲和素按适当摩尔比（如4:1）混合，室温孵育30分钟。
• 使用脱盐柱或透析去除游离染料。

3. 细胞染色

• 固定和透化细胞后，加入稀释后的生物素-4-荧光素（如1-10 μg/mL），室温孵育30-60分钟。
• 洗涤后，用荧光显微镜或流式细胞仪检测（Ex/Em ~494/520 nm）。

4. 荧光免疫分析

• 将生物素化抗体包被于固相载体，加入待测样品，然后加入生物素-4-荧光素标记的亲和素/链霉亲和素，检测荧光信号。

5. 注意事项

• 避光操作，减少荧光淬灭。
• 优化工作浓度以减少背景。
• 使用含0.1% Tween-20的缓冲液洗涤以降低非特异性结合。

储存条件

• 短期储存：2-8°C避光干燥保存，有效期6个月。
• 长期储存：-20°C避光干燥保存，有效期24个月。
• 运输条件：室温运输，避光防潮。
• 注意事项：避免反复冻融，建议分装保存；避免接触强光、潮湿和高温。

相关产品推荐

• 生物素-XX-荧光素（其他间隔臂）：如生物素-6-荧光素（货号PR01494），适用于不同空间需求。
• 链霉亲和素-荧光素（FITC）：直接用于生物素化分子的检测。
• 生物素化抗体：针对特定靶标的生物素化抗体，与本品配套使用。
• 荧光素（FITC）标记试剂盒：用于蛋白质或其他分子的荧光标记。
• 生物素定量检测试剂盒：用于定量生物素化程度。