生物素 dUTPBiotin dUTP

目录号: PR01496 纯度: N/A
生物素 dUTP 可通过酶促反应,进行 DNA 的非放射性标记。标记方式有 PCR 扩增、缺口转移、cDNA 合成、随机引物标记和引物延伸等。PCR 扩增反应标记时,请使用 Taq 聚合酶(dUTP 对古菌聚合酶如 Pfu、Vent 有抑制作用)。
生物素 dUTP(CAS 86303-25-5)产品图
CAS No. :86303-25-5
商品编号 规格 价格 会员价 是否有货 数量
PR01496-50μg 50μg ¥2198.00 请登录
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中文名称
生物素 dUTP
中文别名
1MM BIOTIN-11-DUTP溶液;生物素-11-DUTP溶液
英文名称
Biotin dUTP
英文别名
biotin-11-dUTP;CID 101939310;Biotin-11-dUTP *1 mM in Tris Buffer (pH 7.5)*;Uridine 5'-(tetrahydrogen triphosphate), 2'-deoxy-5-[(1E)-3-[[6-[[5-[(3aS,4S,6aR)-hexahydro-2-oxo-1H-thieno[3,4-d]imidazol-4-yl]-1-oxopentyl]amino]-1-oxohexyl]amino]-1-propen-1-yl]-;Biotin-18-dUTP;Biotin-11-deoxyuridine-5'-triphosphate, triethylammonium salt -;Biotin-11-dUTP 1mM Sodium Solution
Cas No.
86303-25-5
分子式
C28H45N6O17P3S
分子量
862.67
包装储存
-20 ℃,避光,36月,冰袋
详情描述
生物素 dUTP 可通过酶促反应,进行 DNA 的非放射性标记。标记方式有 PCR 扩增、缺口转移、cDNA 合成、随机引物标记和引物延伸等。PCR 扩增反应标记时,请使用 Taq 聚合酶(dUTP 对古菌聚合酶如 Pfu、Vent 有抑制作用)。
产品详情
生物素 dUTP 可通过酶促反应,进行 DNA 的非放射性标记。标记方式有 PCR 扩增、缺口转移、cDNA 合成、随机引物标记和引物延伸等。PCR 扩增反应标记时,请使用 Taq 聚合酶(dUTP 对古菌聚合酶如 Pfu、Vent 有抑制作用)。
运输条件
冰袋
储存方式
-20 ℃,避光,36月,冰袋
FAQ
1.生物素 dUTP为冻干粉末形式,可用 pH 7.5 的 TE 缓冲液或无菌水溶解。
2.使用前可先配制成大浓度储液,小量分装保存。
3.本产品仅限于科研,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
4.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
搜索质检报告(COA)

Early Alteration of Right Ventricle-Pulmonary Artery Coupling in Experimental Heart Failure With Preserved Ejection Fraction.

Journal of the American Heart Association 2024. DOI: 10.1161/JAHA.123.032201 相关性评分:66

文献在方法部分明确使用了生物素-dUTP进行TUNEL染色以检测心肌细胞凋亡,属于目标化合物的直接应用,但仅作为凋亡检测工具而非研究重点,因此化合物匹配度较高但非核心。应用场景为组织切片中的核酸标记(TUNEL),与产品分类描述的'DNA非放射性标记'部分相关,但并非产品主要应用(如PCR、缺口转移等)。实验模型为大鼠HFpEF模型,与产品预期的分子生物学标记应用领域不一致。数据与方法严谨性方面,文献未提供生物素-dUTP的光谱数据、标记效率或细胞毒性等关键表征,仅作为商品化试剂使用,方法描述简略。期刊为JAHA,影响力较好,但研究主题与荧光染料产品相关性有限。总体而言,文献确实使用了目标化合物,但仅作为辅助检测手段,与产品核心应用契合度一般。

One-pot dual-CRISPR/Cas12b-mediated dUTP-LAMP for rapid and sensitive detection of foodborne pathogens without carryover contamination

Food Bioscience 2024. DOI: 10.1016/j.fbio.2024.104069 相关性评分:56

该文献标题明确涉及dUTP-LAMP检测,但摘要为空且关键词缺失,无法确认是否直接使用目标化合物生物素dUTP(CAS 86303-25-5)。dUTP-LAMP通常使用普通dUTP进行防污染检测,而非生物素标记的dUTP,因此化合物匹配度较低。应用场景为食源性病原体核酸检测,与产品分类中核酸标记的酶促反应有一定关联,但并非荧光标记成像或生物素检测场景。实验模型为食品样本检测体系,与产品预期应用领域(PCR扩增、缺口转移、cDNA合成等)部分一致但非典型细胞或动物模型。文献未提供该化合物的光谱数据、标记效率或细胞毒性等关键表征数据,方法学严谨性不足。期刊Food Bioscience影响因子和引用潜力中等,研究创新性一般。总体相关性有限,需谨慎判断是否真正使用了目标化合物。

Rolling circle amplification with fluorescently labeled dUTP—balancing the yield and degree of labeling

Analytical and Bioanalytical Chemistry 2021. DOI: 10.1007/s00216-021-03322-7 相关性评分:62

该文献研究滚环扩增(RCA)中使用荧光标记的dUTP,并探讨产量与标记度的平衡,属于核酸酶促标记应用,与生物素dUTP的产品分类(通过PCR、缺口转移、cDNA合成、随机引物标记等进行DNA非放射性标记)高度契合。然而,文献标题明确为'荧光标记的dUTP',并非生物素dUTP,也未在摘要或关键词中提及生物素,因此可能仅使用同类荧光核苷酸而非目标化合物本身,化合物匹配度中等。实验体系为体外RCA核酸标记,与产品预期应用领域一致,但未涉及细胞或动物模型,模型匹配度一般。文献可能提供标记度、产量等数据,但缺乏针对生物素dUTP的光谱、毒性或光稳定性表征,方法学严谨性中等。期刊Analytical and Bioanalytical Chemistry为分析化学领域知名期刊,影响力尚可。总体而言,该文献与目标产品应用场景相关,但未明确使用生物素dUTP,相关性有限。

Labeling the 3′ Termini of Oligonucleotides Using Terminal Deoxynucleotidyl Transferase

Cold Spring Harbor Protocols 2021. DOI: 10.1101/pdb.prot100685 相关性评分:65

该文献描述了使用末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)在寡核苷酸3'末端进行标记的方法。摘要中明确提到了生物素-ddUTP(biotin-ddUTP)作为标记选项之一,这与目标产品生物素dUTP(biotin-dUTP)属于同一类生物素化核苷酸,但并非完全相同的化合物(ddUTP vs dUTP),且文献未专门针对生物素dUTP进行表征或优化。应用场景为DNA/寡核苷酸的非放射性标记,与产品分类描述中的'DNA非放射性标记'高度契合。实验模型为体外酶促标记体系,与产品预期应用(PCR、缺口转移、cDNA合成等)基本一致。然而,文献为方法学方案,未提供该化合物的光谱数据、标记效率、细胞毒性等关键表征数据,方法严谨性一般。期刊为Cold Spring Harbor Protocols,属于方法学领域权威期刊,但引用潜力有限,创新性一般。综合来看,文献与目标产品相关但非直接使用目标化合物,评分中等偏上。

Sperm deoxyribonucleic acid fragmentation (by terminal deoxynucleotidyl transferase biotin dUTP nick end labeling assay) does not impair reproductive success measured as cumulative live birth rates per donor metaphase II oocyte used.

Fertility and sterility 2022. DOI: 10.1016/j.fertnstert.2022.04.002 相关性评分:71

该文献明确使用末端脱氧核苷酸转移酶生物素dUTP缺口末端标记(TUNEL) assay检测精子DNA碎片化,其中生物素dUTP是TUNEL反应的关键试剂,因此与目标化合物生物素dUTP高度匹配(直接使用)。应用场景为核酸标记(DNA片段化检测),与产品分类描述的DNA非放射性标记(如缺口转移、引物延伸等)相关,但TUNEL并非产品描述中列举的主要标记方式,故应用相关性略降。实验模型为人类精子样本和ICSI临床结局分析,与产品预期应用领域(分子生物学、细胞标记)匹配度一般。文献未提供生物素dUTP的光谱数据、标记效率、细胞毒性或光稳定性等关键表征数据,方法学严谨性主要围绕临床回顾性分析,故该维度得分较低。期刊Fertility and Sterility为生殖医学领域权威期刊,研究涉及864对夫妇的大样本回顾性队列,具有一定影响力,但创新性有限。总体而言,文献确实使用了目标化合物,但应用场景和表征数据与产品核心应用存在一定偏差。

A competitive colorimetric aptasensor for simple and sensitive detection of kanamycin based on terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated signal amplification strategy.

Food chemistry 2022. DOI: 10.1016/j.foodchem.2022.132072 相关性评分:75

文献明确使用生物素-dUTP作为TdT酶促信号放大中的核苷酸底物,通过生物素-链霉亲和素-HRP系统产生比色信号,属于目标化合物的直接应用。应用场景为核酸标记与传感检测,与产品分类描述的'DNA非放射性标记'高度契合,但具体为适配体传感器而非PCR/缺口转移等典型标记方式。实验模型为牛奶和蜂蜜食品样本,与产品预期应用领域(分子生物学标记)部分一致,但非细胞或动物模型。方法学上未提供生物素-dUTP的光谱数据、标记效率或稳定性等关键表征,仅作为信号放大工具使用,严谨性一般。期刊Food Chemistry为高影响力期刊(H-index 392),研究创新性较好,但引用数据缺失。总体相关性较高,但方法学细节不足。

Lateral flow–based nucleic acid detection of SARS-CoV-2 using enzymatic incorporation of biotin-labeled dUTP for POCT use

Analytical and Bioanalytical Chemistry 2022. DOI: 10.1007/s00216-022-03880-4 相关性评分:81

该文献明确使用生物素标记的dUTP(biotin-11-dUTP)通过LAMP酶促掺入进行SARS-CoV-2核酸检测,与目标产品生物素dUTP高度匹配(biotin-11-dUTP为生物素dUTP的直接衍生物)。应用场景为核酸标记与侧向流试纸条检测,与产品分类描述的DNA非放射性标记(PCR、随机引物标记等)高度契合。实验模型包括cDNA和临床咽拭子RNA样本,属于核酸检测体系,与产品预期应用领域一致。方法学上提供了LAMP-LFA的灵敏度、特异性、准确性数据及与RT-LAMP联用检测临床样本的验证,但未提供该化合物的光谱数据或细胞毒性等表征(对生物素dUTP而言非必需)。期刊为Analytical and Bioanalytical Chemistry(h-index 224),研究具有较好的应用创新性,但引用潜力一般。总体而言,该文献与目标产品高度相关,评分较高。

Investigation and validation of labelling loop mediated isothermal amplification (LAMP) products with different nucleotide modifications for various downstream analysis.

Scientific reports 2022. DOI: 10.1038/s41598-022-11320-7 相关性评分:86

文献明确使用生物素-dUTP(biotin-dUTP)作为LAMP扩增的标记核苷酸,并系统研究了其标记效率及下游应用(荧光光谱、凝胶电泳、微阵列、侧向层析),与目标产品(生物素dUTP)的直接应用高度匹配。实验模型为LAMP扩增体系,与产品分类描述的酶促核酸标记应用一致。方法学上详细评估了不同修饰核苷酸对扩增和标记效率的影响,数据严谨。期刊为Scientific Reports,影响力中等,但研究具有较好的应用创新性。总体相关性很高。

1:一般建议:溶解度为Medlife测试数据,可能与文献描述存在差异。这是由于生产工艺和批次不同产生的正常现象。为了使其更好的溶解,请用37℃加热试管并在超声波水浴中震动片刻。不同批次产品溶解度各有差异,仅做参考,具体以实验方案为准。

2:储存条件:粉末-20°C一般情况可以保存3年,溶于溶剂-80°C一般情况可以保存1年。不同产品及不同批次产品可能存在差异,请细致阅读产品信息,并辅助参考相关文献描述。

概述

产品概述

生物素 dUTP(Biotin-dUTP,货号:PR01496,CAS号:86303-25-5)是一种生物素标记的脱氧尿苷三磷酸类似物,可通过酶促反应掺入DNA,实现DNA的非放射性标记。该产品适用于多种标记方法,包括PCR扩增、缺口转移、cDNA合成、随机引物标记和引物延伸等。生物素标记的DNA可通过链霉亲和素或亲和素系统进行检测或捕获,广泛应用于分子生物学研究。

理化性质

理化性质

  • 化学名称:生物素标记的2'-脱氧尿苷-5'-三磷酸(Biotin-dUTP)
  • CAS号:86303-25-5
  • 分子式:C<sub>28</sub>H<sub>44</sub>N<sub>6</sub>O<sub>17</sub>P<sub>3</sub>S(以游离酸计,具体取决于生物素连接臂)
  • 分子量:约 900-1000 Da(取决于连接臂长度)
  • 外观:无色至浅黄色透明液体(通常为水溶液)
  • 浓度:常见为 1 mM 或 10 mM(溶于水或缓冲液)
  • 纯度:≥ 95%(HPLC)
  • 储存缓冲液:通常为10 mM Tris-HCl,1 mM EDTA,pH 7.5
  • 溶解性:易溶于水
  • 稳定性:避免反复冻融,-20°C 避光保存可稳定至少 12 个月
  • 紫外吸收:λ<sub>max</sub> ≈ 260 nm(核苷酸特征吸收)
  • 生物素特性:可与链霉亲和素/亲和素高亲和力结合(K<sub>d</sub> ~10<sup>-15</sup> M)

应用领域

应用领域

生物素 dUTP 主要用于以下领域:

  • 非放射性DNA标记:通过酶促掺入将生物素引入DNA,用于后续的显色或荧光检测。
  • PCR扩增标记:在PCR反应中替代部分dTTP,生成生物素标记的扩增产物,适用于探针制备、杂交实验等。
  • 缺口平移标记:利用DNA聚合酶I的5'→3'外切活性与聚合活性,在DNA链上引入生物素标记。
  • cDNA合成:在逆转录过程中掺入生物素dUTP,获得生物素标记的cDNA,用于基因表达分析或文库构建。
  • 随机引物标记:通过随机引物和Klenow片段聚合酶,将生物素dUTP掺入DNA,制备高比活性的标记探针。
  • 引物延伸:在引物延伸反应中掺入生物素dUTP,用于SNP检测、测序等。
  • DNA检测与捕获:利用生物素-链霉亲和素系统,进行DNA的捕获、富集或信号放大。
  • 原位杂交:制备生物素标记的核酸探针,用于组织切片或细胞的原位杂交检测。

实验方案建议

实验方案建议

1. PCR扩增标记

  • 推荐酶:Taq DNA聚合酶(dUTP对古菌聚合酶如Pfu、Vent有抑制作用,不建议使用)。
  • 反应体系:在常规PCR体系中,用生物素dUTP部分或全部替代dTTP。建议生物素dUTP与dTTP的比例为1:3至1:10,具体比例需根据标记效率与扩增效率优化。
  • 循环参数:与常规PCR相同,但延伸时间可适当延长(如每kb延长15-30秒)。
  • 产物纯化:反应结束后,可通过柱纯化或乙醇沉淀去除未掺入的生物素dUTP。

2. 缺口平移标记

  • 推荐酶:DNA聚合酶I(或Klenow片段)。
  • 反应体系:50 mM Tris-HCl (pH 7.5),10 mM MgCl<sub>2</sub>,10 mM DTT,50 μg/mL BSA,0.1 mM dATP,0.1 mM dCTP,0.1 mM dGTP,0.05 mM dTTP,0.05 mM 生物素dUTP,1 μg DNA模板,5 U DNA聚合酶I。
  • 反应条件:16°C 反应 1-2 小时。
  • 终止反应:加入EDTA至终浓度10 mM。

3. cDNA合成标记

  • 推荐酶:逆转录酶(如M-MLV逆转录酶)。
  • 反应体系:在逆转录反应中,以生物素dUTP替代部分dTTP(建议比例为1:5至1:10)。
  • 反应条件:按逆转录酶说明书进行。

4. 随机引物标记

  • 推荐酶:Klenow片段(3'→5'外切酶活性缺失)。
  • 反应体系:随机引物与模板DNA变性后,加入dNTP混合物(含生物素dUTP)、Klenow片段,37°C反应1-2小时。
  • 终止:加入EDTA或加热失活。

5. 检测方法

  • 显色检测:使用链霉亲和素-辣根过氧化物酶(HRP)结合物,配合化学发光底物或显色底物(如DAB)。
  • 荧光检测:使用链霉亲和素-荧光染料结合物(如FITC、Cy3等)。
  • 捕获实验:使用链霉亲和素包被的磁珠或微孔板进行捕获。

注意事项

  • 生物素dUTP的掺入效率受多种因素影响(如聚合酶种类、dUTP/dTTP比例、反应时间等),建议进行预实验优化。
  • 避免使用对dUTP敏感的聚合酶(如Pfu、Vent等古菌聚合酶)。
  • 实验过程中应设置阳性对照和阴性对照。
  • 生物素dUTP溶液应避免反复冻融,可分装保存。

储存条件

储存条件

  • 储存温度:-20°C 避光保存
  • 储存缓冲液:通常为10 mM Tris-HCl,1 mM EDTA,pH 7.5
  • 稳定性:在推荐条件下可稳定保存至少12个月
  • 注意事项:
  • 避免反复冻融,建议首次使用时根据用量分装,避免多次冻融导致降解。
  • 避光保存,防止光降解。
  • 使用前短暂离心,确保溶液收集于管底。
  • 稀释后的工作液不建议长期保存,建议现配现用。

相关产品推荐

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以下产品常与生物素 dUTP 配合使用:

  • Taq DNA聚合酶:适用于PCR扩增标记。
  • Klenow片段:用于随机引物标记和缺口平移。
  • DNA聚合酶I:用于缺口平移标记。
  • M-MLV逆转录酶:用于cDNA合成标记。
  • 链霉亲和素- HRP结合物:用于化学发光或显色检测。
  • 链霉亲和素-荧光染料结合物:用于荧光检测。
  • 链霉亲和素磁珠:用于生物素标记DNA的捕获。
  • dNTP混合物:用于PCR和标记反应。
  • DNA纯化试剂盒:用于标记后产物的纯化。

如需了解更多信息,请咨询我们的技术支持。

Q1:生物素 dUTP 和普通 dUTP 在化学结构上有什么区别?

生物素 dUTP 是在 dUTP 的尿嘧啶环上通过连接臂共价连接了生物素分子,因此保留了 dUTP 的核苷酸骨架,可被 DNA 聚合酶识别并掺入 DNA,同时引入生物素标签。普通 dUTP 没有这个标记。具体连接臂长度和分子式请参考产品 COA 或说明书。

Q2:收到生物素 dUTP 干粉或浓溶液后,如何配制成工作液?

若为浓溶液,建议用无菌水或推荐缓冲液(如 10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, pH 7.5)稀释至所需浓度,并短暂离心混匀。若为干粉,请先按 COA 标注的溶剂和体积复溶。稀释后的工作液建议现配现用,避免长期保存。具体复溶方法请以产品说明书为准。

Q3:生物素 dUTP 溶液反复冻融几次后还能用吗?

不建议反复冻融。反复冻融可能导致核苷酸降解或沉淀,影响掺入效率。建议首次使用时根据单次用量分装,-20°C 避光保存,并避免多次取出。若发现溶液出现浑浊或沉淀,应停止使用。具体稳定期限请参考 COA 或联系技术支持。

Q4:如何确认生物素 dUTP 的纯度和标记效率?

产品纯度通常通过 HPLC 检测,具体数值请查看批次 COA。标记效率需在您的实验体系中通过掺入反应后,用链霉亲和素-HRP 或荧光结合物进行检测来评估。建议设置阳性对照。若对批次质量有疑问,可联系技术支持获取质检报告。

Q5:在 PCR 标记中,生物素 dUTP 与 dTTP 的比例如何优化?

建议从生物素 dUTP:dTTP 为 1:3 至 1:10 的比例开始预实验,根据标记效率和扩增效率调整。比例过高可能抑制扩增,过低则标记量不足。具体比例需结合聚合酶种类和模板优化。注意 Pfu、Vent 等古菌聚合酶对 dUTP 敏感,不建议使用。

Q6:生物素 dUTP 能否用于 LAMP 反应的产物标记?

可以。有文献报道在 LAMP 反应中掺入生物素 dUTP 可实现产物标记,用于后续侧向流试纸条或显色检测。建议在反应体系中部分替代 dTTP,并优化比例和反应时间。具体实验条件需参考相关文献或进行预实验优化。

参考文献

  1. Investigation and validation of labelling loop mediated isothermal amplification (LAMP) products with different nucleotide modifications for various downstream analysis.
  2. Lateral flow–based nucleic acid detection of SARS-CoV-2 using enzymatic incorporation of biotin-labeled dUTP for POCT use
Q7:生物素 dUTP 在运输和操作时需要注意哪些安全事项?

该产品通常为无危害的核苷酸类似物,操作时仍建议佩戴手套和实验服,避免吸入或接触皮肤。运输条件请参考产品包装说明,一般常温或冰袋运输即可。具体安全信息请查阅 MSDS 或联系技术支持获取。

Q8:使用生物素 dUTP 标记的 DNA 如何检测?

标记后的 DNA 可通过链霉亲和素-辣根过氧化物酶(HRP)结合物进行化学发光或显色检测,也可用链霉亲和素-荧光染料结合物进行荧光检测,或使用链霉亲和素磁珠进行捕获。检测方法的选择取决于下游应用,建议设置阳性和阴性对照。

参考文献

  1. A competitive colorimetric aptasensor for simple and sensitive detection of kanamycin based on terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated signal amplification strategy.
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The molarity calculator equation
Mass (g) = Concentration (mol/L) × Volume (L) × Molecular Weight (g/mol)
The dilution calculator equation
Concentration (start) × Volume (start) = Concentration (final) × Volume (final)
This equation is commonly abbreviated as: C1V1 = C2V2