脂滴蓝色荧光检测试剂盒(LipiD-Blue),英文名为Lipid Droplet Blue Fluorescence Assay Kit with LipiD-Blue,也称LipiD-Blue Staining Kit或Blue Neutral Lipid Stain,是一种基于新型荧光探针LipiD-Blue来检测细胞内脂滴(Lipid droplets)的试剂盒。本试剂盒适用于荧光显微镜、流式细胞仪、荧光酶标仪等荧光检测系统。
脂滴是由磷脂单分子层及甘油三酯(Triglyceride)、胆固醇酯(Cholesteryl ester)组成的中性脂肪(Neutral lipid)疏水核心构成,广泛存在于动物、细菌、酵母、植物和昆虫细胞中。脂滴能够沿着细胞骨架运动,并与其它细胞器相互作用,在脂类代谢与存储、膜转运、蛋白降解、以及信号传导过程中起着重要的作用。多种代谢性疾病,如肥胖、脂肪肝、心血管疾病及糖尿病、中性脂贮存性疾病和Niemann Pick C疾病等,可能都伴随着脂质贮存的异常。
本试剂盒所使用的荧光探针为LipiD-Blue,也称Lipi-Blue,是一种亲脂性染料,适用于脂滴的标记和成像。LipiD-Blue具有良好的光稳定性和适宜的荧光光谱,可与多种常用荧光染料(如GFP和AF555等)兼容,支持多色成像的需求。此外,LipiD-Blue同时适用于固定的细胞和活细胞,并具有较低背景。
LipiD-Blue在细胞中最大激发光波长约为385nm,最大发射光波长约为423nm。
本试剂盒提供的LipiD-Blue为1000X溶液,该溶液经过优化,对大多数细胞都适用,但为了得到满意的结果,对于不同类型的细胞请自行进行一定摸索,LipiD-Blue的终浓度通常为0.5X-5X,最优先的推荐终浓度为1X。本试剂盒提供了绿色细胞核染料Nuclear Green LCS,可染色活细胞或固定后的细胞,方便观察所有的细胞核,Nuclear Green LCS的最大激发波长约510nm,最大发射波长约为535nm。
LipiD-Blue在水和其它极性溶剂中几乎无任何荧光,一旦与甘油三酯等中性脂肪结合,便发出明亮的蓝色荧光。
对于96孔板中的样品,按照每孔使用100μl染色液计算,本试剂盒小包装和中包装分别可以进行1000次和5000次检测;如果用于流式细胞仪检测,按照每个样品的检测体系体积为0.5ml时,本试剂盒小包装和中包装分别可以进行200次和1000次检测;对于6孔板中的贴壁培养细胞样品,按照每孔使用1ml染色液计算,本试剂盒小包装和中包装分别可以进行100次和500次检测。