细胞示踪绿色荧光染色试剂盒(Green CMFDA),即Cell Tracking Green Fluorescence Staining Kit with Green CMFDA,是一种以Green CMFDA (也称CellTracker Green CMFDA或Green CMFDA)为绿色荧光探针用于活细胞荧光示踪的试剂盒。本试剂盒可使用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、荧光酶标仪、流式细胞仪等荧光检测系统进行检测。本试剂盒兼容后续的细胞固定和通透,但染色后再固定和通透,荧光强度会有一定程度的下降。本试剂盒不能用于死细胞或固定后细胞的染色。
Green CMFDA,全称为5-氯甲基荧光素二乙酸酯(5-Chloromethylfuorescein Diacetate),是二乙酸荧光素(Fluorescein diacetate, FDA)的氯甲基衍生物,分子式为C25H17ClO7,分子量为464.85,CAS number为136832-63-8。作为一种细胞膜通透性荧光探针,Green CMFDA能穿透细胞膜进入活细胞,进入胞浆后转化为不可透过细胞的反应产物5-氯甲基荧光素(5-Chloromethylfluorescein, CMF)。本产品具有以下特性:激发后发出明亮的绿色荧光,最大激发波长约为492nm,最大发射波长约为516nm;可通过氯甲基与细胞内的谷胱甘肽(GSH)在谷胱甘肽巯基转移酶(GST)作用下生成不可逆的荧光产物,能完好地保留在胞内,实现长期标记;荧光信号在生理pH值下非常稳定,至少可维持72小时,非常适用于细胞运动、定位、增殖、迁移、趋化和侵袭等示踪研究;在细胞群内,染料只会转移到子代细胞,不会转移到邻近细胞;无毒,不影响细胞活力或增殖。
对于96孔板中的样品,按照每孔使用100μl染色液计算,本试剂盒的小包装和中包装可以进行500次和2000次检测;如果用于流式细胞仪检测,按照每个样品的检测体系体积为0.5ml时,本试剂盒的小包装和中包装可以进行100次和400次检测;对于6孔板中的贴壁培养细胞样品,按照每孔使用1ml染色液计算,本试剂盒的小包装和中包装可以进行50次和200次检测。