细胞示踪蓝色荧光染色试剂盒(Blue CMAC),即Cell Tracking Blue Fluorescence Staining Kit with Blue CMAC,是一种以Blue CMAC (也称CellTracker Blue CMAC或Blue CMAC)为蓝色荧光探针用于活细胞荧光示踪的试剂盒。本试剂盒可使用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、荧光酶标仪、流式细胞仪等荧光检测系统进行检测。本试剂盒兼容后续的细胞固定和通透,也适用于死细胞或固定后细胞的染色。
Blue CMAC全称为7-氨基-4-氯甲基香豆素(7-Amino-4-chloromethylcoumarin),是氨基香豆素的氯甲基衍生物,分子式为C10H8ClNO2,分子量为209.63,CAS number为147963-22-2。作为一种细胞膜通透性荧光探针,Blue CMAC能穿透细胞膜进入活细胞,并被胞内酯酶水解,释放出具有反应活性的氯甲基基团,同时产生微弱荧光。该活性基团随后与细胞内富含的还原型谷胱甘肽(Glutathione, GSH)中的巯基(-SH)发生不可逆共价结合,形成具有强蓝色荧光的CMAC-GSH加合物。该探针具有以下特性:激发后发出明亮的蓝色荧光,最大激发波长约为353nm,最大发射波长约为466nm;可通过氯甲基与细胞内的GSH在谷胱甘肽S-转移酶(Glutathione S-transferase, GST)作用下生成不可逆的荧光产物,能完好地保留在胞内,实现长期标记;荧光信号在生理pH值下非常稳定,至少可维持48小时,非常适用于细胞运动、定位、增殖、迁移、趋化和侵袭等示踪研究;在细胞群内,染料只会转移到子代细胞,不会转移到邻近细胞;无毒,不影响细胞活力或增殖。
对于96孔板中的样品,按照每孔使用100μl染色液计算,本试剂盒的小包装和中包装可以进行500次和2000次检测;如果用于流式细胞仪检测,按照每个样品的检测体系体积为0.5ml时,本试剂盒的小包装和中包装可以进行100次和400次检测;对于6孔板中的贴壁培养细胞样品,按照每孔使用1ml染色液计算,本试剂盒的小包装和中包装可以进行50次和200次检测。