PMA qPCR 活菌检测试剂盒（No Primer） 是一种高亲和性的 DNA 结合染料，该染料本身具有微弱的荧光，与核酸结合后可以发出更为明亮的荧光。它尤其与双链 DNA 具有高亲和性。PMA qPCR 活菌检测试剂盒（No Primer） 不具有细胞膜渗透性，因此可选择性地修饰膜受损的死细胞的 DNA。PMA qPCR 活菌检测试剂盒（No Primer） 修饰的 DNA 经蓝光 (~464 nm) 光解后，PMA qPCR 活菌检测试剂盒（No Primer） 上的光反应性叠氮基转化为高反应性氮烯自由基，与 DNA 结合位点附近的任何烃部分反应形成稳定的共价氮碳键，从而导致永久性 DNA 修饰。该修饰过程会使 DNA 不溶，并使其在随后的基因组 DNA 提取过程中与细胞碎片一起丢失，进而阻碍死细胞中目标 DNA 的 PCR 扩增。残留在溶液中未结合的 PMA，在强光照射下与水分子反应分解成无交联活性的羟胺化合物，使羟胺不再能够共价结合 DNA，从而不影响 PCR 扩增。这个特性使得 PMA qPCR 活菌检测试剂盒（No Primer） 可以通过实时定量 PCR (qPCR) 的手段，检测多种样本类型包括：细菌、生物膜、酵母、真菌、病毒和真核细胞；与 qPCR、NGS、Sanger 测序 LAMP 技术相结合，广泛应用在食品和水安全和环境测试中。

冰袋

-20 ℃，避光，24月，冰袋

1.PMA 根据细胞膜通透性区分死菌和活菌。许多杀死细菌的方法会导致细胞膜受损，因此适用于 PMA 检测。但有些方法，如紫外线照射，可能不会立即导致细胞膜破裂（会出现假阳性）。因此，在选择 PMA 检测之前，需先进行文献检索和预实验确定是否适用于您选择的细菌类型和杀伤方法。
2.PMA 处理完细菌后需要进行光解，以使染料与死细胞 DNA 共价结合。
注：光解操作可以使用蓝色。一般来说，灯越亮，光解步骤的效率就越高。非 LED 灯（如卤素灯）可能会加热您的样本并对分析产生负面影响，照射时需要使用冰块对样品降温处理。
3.样本可以在光解后冷冻保存。若在进行 PMA 处理光解之前冷冻样本可能会损坏细胞膜并产生假阴性结果。如需在检测之前冷冻样本，建议先进行预实验。
4.PMA 的部分作用机制是通过沉淀从样本中去除 PMA 共价修饰的 DNA；因此，在提取基因组 DNA 时，需使用相同体积的基因组 DNA 洗脱液，进行体积归一化处理。阳性对照可以使用活细胞的基因组 DNA。
5.为了验证 PMA 在测试样本中的有效性，可对比同处理样本 -/+PMA 之间的 Ct (dCt) 变化。
6.使用前请将产品瞬时离心至管底，再进行后续实验。
7.试剂盒组分中含有荧光染料，使用及保存过程中注意避光。
8.本产品仅限于科研，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
9.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。