死细胞绿色荧光染色试剂盒,即Dead Cell Green Fluorescence Staining Kit,是一种快速、高效、便捷的基于绿色荧光探针Nuclear Green Probe特异地对坏死细胞的细胞核进行染色的试剂盒。本试剂盒可使用含有相关检测通道的荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪等荧光检测系统进行检测。
聚集诱导发光(Aggregation-induced emission, AIE)是由中国科学院院士唐本忠教授于2001年提出的原创性新科学概念。具有AIE效应的材料,在分散态下发光微弱甚至不发光,聚集后发光显著增强,呈现出颠覆传统认知的光物理现象。目前AIE已成为生物学、医学、化学、材料等领域的研究热点,多次入选全球热点前沿研究领域。
AIE系列荧光探针有如下特点。1. 聚集诱导发光。AIE荧光探针在溶液及细胞环境中能保持微弱的荧光信号,而进入细胞并与目标结构结合聚集后,其荧光信号会大幅度增强,因此在成像过程中可以忽略溶液及细胞中未与特定结构结合的荧光分子,从而在染色后通常可以直接进行成像,无需多次洗涤,可以显著简化成像流程。2. 较大的斯托克斯(Stokes)位移。AIE荧光探针在荧光成像中能够极大程度地避免信号串扰和自淬灭现象,显著提高荧光成像清晰度,从而进一步提升成像精确度。3. 极佳的光学稳定性。AIE荧光探针能在长时间的细胞成像过程中维持稳定的荧光信号输出,特别适用于长期追踪、多次扫描的荧光成像实验。4. 抗淬灭能力强。与传统荧光探针相比,AIE荧光探针能有效规避浓度过高导致的荧光淬灭问题,在高浓度应用场景更有竞争力。
Nuclear Green Probe,是一种新型的非细胞膜通透性的细胞核荧光探针,不能穿过具有生物活性的细胞质膜,但可穿过死细胞膜的无序区域而到达细胞核,并嵌入细胞的DNA双螺旋,从而产生明亮的绿色荧光。因此,Nuclear Green Probe仅能对死细胞或固定并通透后细胞的染色,从而被用来区分正常细胞与坏死细胞。本探针是一种基于聚集诱导发光荧光材料的三苯氨基衍生物,具有典型的聚集诱导发光效应特性。
Nuclear Green Probe在进入细胞之前荧光信号非常弱,在进入细胞并与细胞核DNA双螺旋结合前后由于聚集状态的变化其荧光强度会产生极为明显的变化。Nuclear Green Probe被激发后可以发出绿色的荧光。其中,最大激发波长为455nm,最大发射波长为551nm。
本试剂盒内提供的Nuclear Green Probe (1000X)为储存液,推荐Nuclear Green Probe的使用浓度为1X,孵育时间为10-30分钟。为了达到良好的染色效果,建议根据自身实验条件和细胞或组织摸索Nuclear Green Probe的使用浓度与染色时间。
以96孔板为例,本试剂盒小包装的Nuclear Green Probe可以进行100次染色。