细胞内pH检测试剂盒(BCECF AM) (Intracellular pH Assay Kit with BCECF AM)，是一种以BCECF AM为荧光探针，快速灵敏地检测细胞内pH的试剂盒。本试剂盒可使用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪、荧光酶标仪等荧光检测系统进行检测。本试剂盒同时包含一系列pH校准缓冲液(pH5.0-9.0)，可用于细胞内pH值的定量检测。

细胞内pH值是细胞内氢离子(H⁺)浓度的一种计量方式，它几乎对细胞功能的所有方面都有着深远影响，包括细胞生长、离子转运、内吞作用、细胞粘附、酶活性、蛋白质-蛋白质相互作用、膜转运过程以及细胞的增殖、分化和凋亡等。细胞内pH值的微小变化都有可能显著改变生物体的生理和病理状态，与癌症及神经系统性疾病等重大疾病的发生发展密切相关，细胞内pH值的测定在生物学和生物化学研究中具有重要意义。

BCECF AM，即2',7'-bis-(2-carboxyethyl)-5-(and-6)-carboxyfluorescein, acetoxymethyl ester，是最常用的检测细胞内pH的比率型荧光探针。BCECF AM是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。BCECF AM没有荧光，进入细胞后可以被细胞内的酯酶水解形成BCECF，从而被滞留在细胞内。BCECF在适当的pH值情况下可以被激发形成绿色荧光。最大激发波长和发射波长因pH的不同而有所不同，在酸性环境下(低pH)的最大激发波长大致在450nm左右，在碱性环境下(高pH)的最大激发波长大致在503nm左右，最大发射波长大致在520nm左右，实际检测时推荐使用的激发波长为440nm和505nm，发射波长为535nm。

本试剂盒组分齐全，使用便捷。除BCECF AM (1000X)和配制染色工作液所需的Assay Buffer以外，本试剂盒还提供一系列pH校准缓冲液(pH5.0-9.0)，配合使用尼日利亚菌素(Nigericin)，仅需处理细胞10分钟，即可实现细胞内与细胞外溶液pH值的快速平衡。与BCECF AM配合使用时，可用于创建测定细胞内pH值的标准曲线从而用于定量检测。

本试剂盒适用范围广。BCECF AM不仅被广泛用于哺乳动物细胞的研究，也有报道用于动物组织、植物细胞、细菌和酵母等的细胞内pH水平检测。在有细胞内pH变化的细胞毒性、细胞凋亡、细胞粘附、药物抵抗、细胞趋化等过程中BCECF AM被广泛应用。

用于细胞内pH检测时，常用的BCECF AM的浓度为1X，按照96孔板每孔需100μl染色工作液，本试剂盒小包装可进行200次检测，中包装可进行1000次检测。