线粒体亚铁离子绿色荧光检测试剂盒(Mito-FerroGreen2)，即Mitochondrial Green Fluorescent Ferrous Ion Assay Kit with Mito-FerroGreen2，是一种基于绿色荧光探针Mito-FerroGreen2，快速灵敏地检测活细胞线粒体内亚铁离子(Fe2+)的试剂盒。本试剂盒可以使用荧光显微镜进行荧光成像检测，也可以使用荧光酶标仪和流式细胞仪等进行荧光的定量检测。

铁(Iron)是人体中丰度较高的必需微量元素之一，通常以还原态的二价铁离子(Fe2+, Ferrous Ions)和氧化态的三价铁离子(Fe3+, Ferric Ions)两种状态存在，这两种状态间氧化还原循环的平衡有助于铁作为酶和蛋白等活性所需的辅助因子，以维持酶和蛋白等的正常生物学功能。线粒体是细胞内富含铁的核心细胞器，铁离子在其中主要参与能量生成和血红素合成两大过程，在线粒体电子传递链中，铁以血红素或铁硫簇(Fe-S簇)的形式作为电子传递介质，其氧化还原活性驱动电子传递与质子泵出，从而形成质子梯度用于合成ATP。同时，血红素合成的起始步骤(氨基乙酰丙酸的合成)与终末步骤(Fe2+插入原卟啉IX)均在线粒体中完成，且催化终末步骤的亚铁螯合酶仅特异性识别Fe2+，无法结合Fe3+，因此线粒体内Fe2+的稳态对血红素合成至关重要。亚铁浓度过低会阻碍血红素合成，引发缺铁性贫血，导致组织缺氧、免疫力下降等临床症状。因此精准检测线粒体亚铁离子含量，对于理解细胞能量代谢和血红素合成等核心生理功能，揭示铁稳态失衡相关疾病的发生机制以及指导临床诊疗至关重要。

Mito-FerroGreen2是一种和Mito-FerroGreen类似的新型线粒体亚铁离子绿色荧光探针，具有高选择性和高灵敏度，能特异性结合线粒体内亚铁离子，而不受钙、镁、锌和铜等常见金属离子的干扰。该探针还具备优异的细胞膜通透性和低细胞毒性，可用于活细胞线粒体内亚铁离子的实时荧光成像。与亚铁离子结合后，其荧光信号显著增强，从而实现对线粒体内游离亚铁离子的精准检测。Mito-FerroGreen2特别适用于细胞线粒体的铁代谢、氧化应激以及铁死亡(Ferroptosis)等的研究。Mito-FerroGreen2在线粒体内与亚铁离子结合后的最大激发波长约为515nm，发射波长约为545nm。

本试剂盒提供了用于稀释Mito-FerroGreen2 (1000X)的检测缓冲液(Assay Buffer)，该检测缓冲液可以极大程度地保证细胞活力和接近正常的生长状态。

对于96孔板中的样品，按照每孔使用100μl Mito-FerroGreen2染色液计算，本试剂盒的小包装和中包装分别可以进行200次和1000次检测；如果用于流式细胞仪检测，按照每个样品的检测体系体积为0.5ml时，本试剂盒的小包装和中包装分别可以进行40次和200次检测；对于6孔板中的贴壁培养细胞样品，按照每孔使用1ml Mito-FerroGreen2染色液计算，本试剂盒的小包装和中包装分别可以进行20次和100次检测。