5-CFDA 是一种常见的脂肪族荧光素系列物。CFDA 可在细胞内自由扩散，并被细胞内非特异性脂肪酶水解生成羧基荧光素 (CF)。与荧光素染料相比，含有 CF 的部分带有额外的负电荷，使它能够更好地保留在细胞中。

5-CFDA is a common aliphatic luciferin-line organism. CFDA conducts free diffusion into cells, and then it is hydrolyzed into carboxyl fluorescein (CF) by intracellular non-specific lipase. CF containing portion contains an additional negative charge so that it is better retained in cells, compared to fluorescein dyes.

Solid

5-CFDA 工作液的配制
1.制备储存液
用 DMSO 配制 10 mM 的 5-CFDA。如用 0.2172 mL DMSO 溶解 1 mg 5-CFDA。
注：5-CFDA 储存液建议分装后于 -20℃ 或 -80℃ 避光保存。
2.配制工作液
用预热好的无血清细胞培养基或 PBS 稀释储存液，配制成 1-10 μM 的 5-CFDA 工作液。
注：请根据实际情况调整 5-CFDA 工作液浓度，且现用现配。

细胞染色
1. 细胞制备：
悬浮细胞：离心收集细胞，加入 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟。
贴壁细胞：弃去培养基，加入胰蛋白酶消化细胞。离心弃去上清后，加入 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟。
2. 加入 1 mL 5-CFDA 工作液，室温孵育 15 分钟。
3. 400 g，4℃ 离心 3-4 分钟，弃去上清。
4. 加入 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟。
5. 用 1 mL 无血清培养基或 PBS 重悬细胞后，在荧光显微镜或流式细胞仪下检测。

注意事项
1. 5-CFDA 储存液建议分装后于 -20℃ 或 -80℃ 避光保存，避免反复冻融。-20℃ 可保存 1 个月，-80℃ 可保存半年。
2. 请根据实际情况调整 5-CFDA 工作液浓度。
3. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.

-20°C, protect from light In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)

[1]. Yang T, et al. A novel nonradioactive CFDA assay to monitor the cellular immune response in myeloid leukemia. Immunobiology. 2013 Apr;218(4):548-53.
[2]. Card SD, et al. Assessment of fluorescein-based fluorescent dyes for tracing Neotyphodium endophytes in planta. Mycologia. 2013 Jan-Feb;105(1):221-9.

In Vitro: DMSO : ≥ 100 mg/mL (217.21 mM)配制储备液