HKYellow-AM (6/12-mixture) 是一种黄色荧光探针，可高选择性、高灵敏度地检测活细胞、组织内的 ONOO-，且无细胞毒性。

HKYellow-AM (6/12-mixture) is a yellow fluorescent probe that can detect ONOO- in living cells and tissues with high selectivity and sensitivity without cytotoxicity.

Solid

1. HKYellow-AM (6/12-mixture) 工作液的配制
1.1 制备储存液
用 70 μL 无水 DMSO 稀释 1 mg HKYellow-AM (6/12-mixture) 去配制 10 mM 的储备液。
注：HKYellow-AM (6/12-mixture) 储存液建议分装后于 -20℃ 或 -80℃ 避光保存。
1.2 工作液的配制
用预热好的无血清细胞培养基或 PBS 稀释储存液，配制成 1-10 μM 的 HKYellow-AM (6/12-mixture) 工作液。
注：请根据实际情况调整 HKYellow-AM (6/12-mixture) 工作液浓度，且现用现配。
2. 细胞染色 (悬浮细胞)
2.1 离心收集细胞，加入 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟。细胞密度在1×10/mL。
2.2 加入 1 mL HKYellow-AM (6/12-mixture) 工作液，室温孵育 5-30 分钟。
2.3 400 g，离心 3-4 分钟，弃去上清。
2.4 加入 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟。
2.5 用 1 mL 无血清培养基或 PBS 重悬细胞后，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。
3. 细胞染色 (贴壁细胞)
3.1 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
3.2 从培养基中移出盖玻片，吸除多余培养基。
3.3 加入 100 μL 染料工作液，轻轻晃动使其完全覆盖细胞，孵育 5-30 分钟。
3.4 吸去染料工作液，用培养基洗 2-3次，每次 5 分钟 ，使用荧光显微镜进行观察。
注：若需要用流式细胞仪检测，需将细胞用胰蛋白酶消化重悬后再进行染色。 has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.

-20°C, sealed storage, away from moisture and light In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture and light)

[1]. Trends Cell Biol. 2007 Sep;17(9):422-7. doi: 10.1016/j.tcb.2007.07.009. Epub 2007 Sep 4.
[2]. Yang D, et, al. Diarylamine-based fluorogenic probes for detection of peroxynitrite. EP2809666B1.
[3]. Yang D, et, al. Diarylamine-based fluorogenic probes for detection of peroxynitrite. EP2809666B1.

In Vitro: DMSO : 130 mg/mL (91.39 mM; Need ultrasonic)配制储备液