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Cyanine2 羧酸Cyanine2 carboxylic acid

目录号: PC21395 纯度: COA
Cyanine2 羧酸是一种绿色荧光染料，其吸收和发射光谱与罗丹明绿、FITC 和 Alexa Fluor 488 类似。
Cyanine2 羧酸（CAS 260430-02-2）产品图
CAS No. :260430-02-2
商品编号 规格 价格 会员价 是否有货 数量
PC21395-1mg 1mg ¥537.00 请登录
PC21395-5mg 5mg ¥1315.00 请登录
PC21395-25mg 25mg ¥4285.00 请登录
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中文名称
Cyanine2 羧酸
中文别名
2-[3-[3-(5-羧基戊基)-2(3H)-苯并恶唑亚基]-1-丙烯-1-基]-3-乙基苯并恶唑鎓内盐;CY2
英文名称
Cyanine2 carboxylic acid
英文别名
Cy2;6-(2-(3-(3-Ethylbenzo[d]oxazol-3-ium-2-yl)allylidene)benzo[d]oxazol-3(2H)-yl)hexanoate;Benzoxazolium, 2-[3-[3-(5-carboxypentyl)-2(3H)-benzoxazolylidene]-1-propen-1-yl]-3-ethyl-, inner salt;6-[2-[(E,3Z)-3-(3-Ethyl-1,3-benzoxazol-2-ylidene)prop-1-enyl]-1,3-benzoxazol-3-ium-3-yl]hexanoate
Cas No.
260430-02-2
分子式
C25H26N2O4
分子量
418.48
包装储存

-20°C, protect from light

*In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)
详情描述

Cyanine2 羧酸是一种绿色荧光染料，其吸收和发射光谱与罗丹明绿、FITC 和 Alexa Fluor 488 类似。该染料具有较高的荧光量子产率和荧光稳定性，即使在长时间的激发光照射下，也能保持稳定的荧光性能。也具有良好的水溶性和生物相容性，对细胞和组织无明显毒性。羧酸基团使其能够与生物分子（如蛋白质、核酸等）中的氨基发生反应，形成稳定的酰胺键。

性状：桔红色固体；

溶解度：易溶于甲醇、DMF等有机溶剂；

标记对象：氨基；

保存：避光，干燥，-20℃保存；

相关分类：Cy系列 (Cyanine);Cyanine2；

查询关键词：260430-02-2，Cyanine2 羧酸，Cyanine2 carboxylic acid，PC21395，Medlife。
生物活性

Cyanines are formally compounds with two nitrogen atoms linked by an odd number of methene units. 26 28 The nitrogen atoms are parts of the heterocyclic units (such as indole, benzoxazol, or benzothiazol) . The structures and optical properties of representative cyanine dyes used for in vivo imaging are presented. Cyanines are characterized by long wavelength, tunable absorption and emission, very high extinction coefficient (up to 300,000 M 1 cm 1), good water solubility, and relatively straightforward synthesis.

性状

Solid

体外研究(In Vitro)

原液制备
1. 蛋白准备
为了获得最佳标记效果，请将蛋白 (抗体) 浓度配制为 2 mg/mL。
1) 蛋白溶液 pH 值应为 8.5±0.5，若 pH 低于 8.0，则用 1 M 碳酸氢钠进行调整。
2) 若蛋白浓度低于 2 mg/mL，标记效率会大大降低，为了获得最佳标记效率，建议最终蛋白质浓度范围为 2-10 mg/mL。
3) 蛋白必须在不含伯胺 (如 Tris 或甘氨酸) 和铵离子的缓冲液中，否则会影响标记效率。
2. 染料准备
将无水 DMSO 稀释 CY 染料，制成 10 mM 储备溶液。通过玻璃管或旋涡充分混合。
注：CY 储存液建议分装后于 -20 ℃ 或 -80 ℃ 避光保存。
3. 染料工作液用量计算
标记反应所需的 CY 染料用量取决于要标记蛋白的用量，CY 染料与蛋白的最佳摩尔比为 10 左右。
例：假如所需标记蛋白为 500 μL 2 mg/mL 的 IgG (MW=150,000),用 100 μL DMSO 溶解一管 1 mg CY 染料，则所需 CY 体积为 3.95 μL，详细计算流程如下 (以 CY3-NHS ester 为例) ：
1) mmol (IgG) = mg/mL (IgG) ×mL (IgG) / MW (IgG) =2 mg/mL×0.5 mL / 150,000 mg/mmol= 6.7×10-6 mmol
2) mmol (CY3-NHS ester) = mmol (IgG) ×10 =6.7×10-6 mmol×10 = 6.7×10-5 mmol
3) μL (CY3-NHS ester) = mmol (CY3-NHS ester) ×MW (CY3-NHS ester) / mg/μL (CY3-NHS ester) = 6.7×10-5 mmol× 590.15 mg/mmol / 0.01 mg/μL =3.95 μL (CY3-NHS ester)


使用方法
1. 标记反应
1) 取算好体积的新鲜配制的 10 mg/mL CY 染料缓慢加入到 0.5 mL 蛋白样品溶液中，轻轻摇匀混合，然后短暂离心将样品收集在反应管底部。切忌剧烈混匀，防止蛋白样品变性失活。
2) 将该反应小管置于避光处，在室温条件下轻轻摇晃孵育 60 分钟，每隔 10–15 分钟，将反应小管轻轻颠倒几次，以充分混合两种反应物，提高标记效率。
2. 蛋白纯化脱盐
以下方案是使用 SepHadex G-25 柱纯化染料蛋白偶联物为例。
1) 按照生产说明书制备 SepHadex G-25 柱。
2) 将反应混合物装入 SepHadex G-25 色谱柱顶部。
3) 当样品运行到顶部树脂表面下方时，立即加入 PBS (pH 7.2-7.4)。
4) 向所需样品中加入更多的 PBS (pH 7.2-7.4),完成柱纯化。结合含有所需要的染料-蛋白质缀合物的组分。

Medlife has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.
运输条件

Room temperature or refrigerated transportation.
储存方式

-20°C, protect from light

*In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)
参考文献
溶解度数据
体外研究: 

DMSO : ≥ 30 mg/mL (71.69 mM)

* "≥" means soluble, but saturation unknown.

配制储备溶液
浓度 溶剂体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.3895 mL 11.9477 mL 23.8954 mL
5 mM 0.4779 mL 2.3895 mL 4.7791 mL
10 mM 0.2390 mL 1.1948 mL 2.3895 mL
*

产品不同，其溶解度不同。建议根据产品选择合适的溶剂配制储备溶液；配成溶液后，建议分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
储备液的保存方式和期限：-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)。-80°C 储存时，建议在 6 个月内使用，-20°C 储存时，建议在 1 个月内使用。
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1：一般建议：溶解度为Medlife测试数据，可能与文献描述存在差异。这是由于生产工艺和批次不同产生的正常现象。为了使其更好的溶解，请用37℃加热试管并在超声波水浴中震动片刻。不同批次产品溶解度各有差异，仅做参考，具体以实验方案为准。

2：储存条件：粉末-20°C一般情况可以保存3年，溶于溶剂-80°C一般情况可以保存1年。不同产品及不同批次产品可能存在差异，请细致阅读产品信息，并辅助参考相关文献描述。

概述

Cyanine2 羧酸（CAS号：260430-02-2，货号：PC21395）是一种绿色荧光染料，其吸收和发射光谱与罗丹明绿、FITC 和 Alexa Fluor 488 类似。该染料具有较高的荧光量子产率和荧光稳定性，即使在长时间的激发光照射下，也能保持稳定的荧光性能。此外，它具有良好的水溶性和生物相容性，对细胞和组织无明显毒性。羧酸基团使其能够与生物分子（如蛋白质、核酸等）中的氨基发生反应，形成稳定的酰胺键，广泛应用于生物标记和成像领域。

理化性质

性质 描述
外观 桔红色固体
溶解度 易溶于甲醇、DMF等有机溶剂
荧光特性 激发/发射波长与FITC、Alexa Fluor 488类似（最大吸收约490 nm，最大发射约510 nm）
荧光量子产率 高
光稳定性 优异，长时间激发下荧光性能稳定
水溶性 良好
生物相容性 良好，对细胞和组织无明显毒性
反应基团 羧酸（-COOH），可与氨基反应形成酰胺键
保存条件 避光、干燥、-20℃保存

应用领域

  • 蛋白质标记：通过羧酸基团与蛋白质的氨基偶联，用于免疫荧光、Western blot、流式细胞术等。
  • 核酸标记：标记氨基修饰的寡核苷酸，用于FISH、qPCR探针等。
  • 细胞成像：活细胞或固定细胞的荧光成像，得益于良好的生物相容性和光稳定性。
  • 流式细胞术：作为绿色荧光通道的标记染料，用于细胞表面或细胞内抗原的检测。
  • 药物递送研究：标记纳米颗粒或药物载体，追踪其体内分布。
  • 生物传感器：构建荧光探针，检测生物分子相互作用。

实验方案建议

1. 标记反应（以蛋白质为例）

  • 缓冲液：使用不含氨基的缓冲液（如PBS、碳酸盐缓冲液，pH 7.5-8.5）。避免使用Tris、甘氨酸等含氨基的缓冲液。
  • 染料准备：将Cyanine2 羧酸溶解于无水DMF或DMSO中，配制为10 mM储备液（避光保存，现配现用）。
  • 活化：推荐使用EDC/NHS活化羧酸基团：将染料储备液与EDC（10当量）和NHS（10当量）在pH 5.5-6.5的MES缓冲液中室温反应15-30分钟。
  • 偶联：将活化的染料加入蛋白质溶液（蛋白质浓度≥1 mg/mL），摩尔比（染料:蛋白质）建议为5:1至20:1，室温避光反应1-2小时。
  • 纯化：使用脱盐柱或透析去除游离染料，可通过测定A280和染料特征吸收计算标记度（DOL）。

2. 细胞成像实验

  • 染色：将标记的抗体或探针与细胞孵育，具体浓度需优化（建议起始浓度1-10 μg/mL）。
  • 洗涤：用PBS洗涤3次，去除未结合染料。
  • 成像：使用配备GFP/FITC滤光片组的荧光显微镜，激发波长约490 nm，发射波长约510 nm。

3. 注意事项

  • 所有操作尽量避光进行。
  • 染料储备液应分装保存于-20℃，避免反复冻融。
  • 标记反应后需验证标记效率及生物分子活性。

储存条件

  • 储存条件：避光、干燥、-20℃保存。
  • 稳定性：在建议条件下可稳定保存24个月。
  • 运输条件：室温运输，避光防潮。
  • 注意事项：避免接触强光、潮湿和高温；取用后立即密封并放回-20℃；溶液状态下建议分装避光保存于-20℃，避免反复冻融。

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FITC 异构体I PC21400 绿色荧光染料，与Cyanine2光谱类似
Alexa Fluor 488 羧酸 PC21401 绿色荧光染料，光谱与Cyanine2类似
Q1:Cyanine2 羧酸的最大吸收和发射波长是多少？与 FITC 相比光谱有区别吗？

Cyanine2 羧酸的最大吸收约 490 nm，最大发射约 510 nm，与 FITC 和 Alexa Fluor 488 的光谱类似，因此可使用 GFP/FITC 滤光片组进行检测。与 FITC 相比，Cyanine2 的荧光量子产率较高且光稳定性优异，在长时间激发下荧光信号衰减较慢。具体光谱数据请以批次 COA 或产品说明书为准。

Q2:Cyanine2 羧酸易溶于哪些溶剂？配制 10 mM 储备液时需要注意什么？

Cyanine2 羧酸易溶于甲醇、DMF 等有机溶剂，也可用无水 DMSO 配制储备液。建议在避光条件下配制 10 mM 储备液，现配现用，并分装保存于 -20℃ 避免反复冻融。若需水相反应，请先将染料溶于少量有机溶剂再稀释至缓冲液中，具体溶解方案可参考产品说明书或联系技术支持确认。

Q3:Cyanine2 羧酸固体和溶液状态分别怎么保存？反复冻融会影响稳定性吗？

固体建议避光、干燥、-20℃ 保存，在建议条件下可稳定保存 24 个月。溶液状态建议分装避光保存于 -20℃，避免反复冻融，因为反复冻融可能导致染料聚集或荧光性能下降。取用后应立即密封并放回 -20℃，避免接触强光、潮湿和高温。具体稳定性数据请以批次 COA 为准。

Q4:如何确认 Cyanine2 羧酸的纯度和批次质量？COA 中应关注哪些指标？

建议查看批次 COA 中的外观、溶解度、光谱特性（最大吸收/发射波长）及纯度检测结果（如 HPLC 或质谱）。Cyanine2 羧酸为桔红色固体，易溶于甲醇、DMF。若 COA 中未列出某项指标，或对批次质量有疑问，请联系技术支持获取补充信息。纯度不合格可能影响标记效率，使用前请核对 COA 与实验要求是否匹配。

Q5:用 Cyanine2 羧酸标记蛋白质时，染料与蛋白质的摩尔比和缓冲液如何选择？

推荐染料与蛋白质摩尔比为 5:1 至 20:1，蛋白质浓度不低于 1 mg/mL，缓冲液应不含氨基（如 PBS 或碳酸盐缓冲液，pH 7.5-8.5），避免使用 Tris、甘氨酸。羧酸基团需经 EDC/NHS 活化后与氨基形成酰胺键。具体比例需根据蛋白种类和标记度要求优化，可先进行小规模预实验，并参考产品说明书或联系技术支持。

Q6:Cyanine2 羧酸用于细胞成像时，起始浓度和激发/发射滤光片如何设置？

细胞成像时建议起始浓度 1-10 μg/mL，具体浓度需根据细胞类型和探针形式优化。Cyanine2 的最大吸收约 490 nm、最大发射约 510 nm，可使用配备 GFP/FITC 滤光片组的荧光显微镜，激发波长约 490 nm，发射波长约 510 nm。染色后建议用 PBS 洗涤 3 次去除未结合染料，所有操作尽量避光进行。

Q7:Cyanine2 羧酸运输条件是什么？收到后如何检查和处理？

Cyanine2 羧酸通常室温运输，避光防潮。收到后请检查包装是否完好、产品外观是否为桔红色固体，并核对 COA。建议立即按标签条件避光、干燥、-20℃ 保存。操作时佩戴手套和护目镜，避免吸入或接触皮肤。具体安全信息请参考产品 SDS 或联系技术支持获取。

Q8:Cyanine2 羧酸标记核酸时，对氨基修饰的寡核苷酸有什么要求？

Cyanine2 羧酸可通过羧酸基团与氨基修饰的寡核苷酸反应形成酰胺键，用于 FISH 或 qPCR 探针标记。反应前需确认寡核苷酸带有氨基修饰，并使用不含氨基的缓冲液。染料需经 EDC/NHS 活化后与氨基偶联。具体标记比例、纯化方式和检测方法需根据寡核苷酸序列和实验体系优化，建议先查阅相关文献或联系技术支持。

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