胆固醇摄取荧光检测试剂盒(BDPY-Cholesterol) (Cholesterol Uptake Assay Kit with BDPY-Cholesterol),也称胆固醇摄取荧光示踪试剂盒、Cholesterol Uptake Fluorometric Assay Kit、胆固醇摄取检测试剂盒(Cholesterol Uptake Kit),是一种以BDPY (也称BODIPY)标记的胆固醇为绿色荧光探针,快速高灵敏地检测细胞胆固醇摄取能力或进行胆固醇摄取或转运抑制剂筛选的试剂盒。本试剂盒可使用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、荧光酶标仪、流式细胞仪等荧光检测系统进行检测。
BDPY标记胆固醇(BDPY-Cholesterol, 也称BODIPY-Cholesterol或BDPY-Chol)是用二氟化硼二吡咯甲烷(Boron-Dipyrromethene, BODIPY, BDPY)荧光基团标记的胆固醇,也称BDPY 480/508-Cholesterol或BODIPY 480/508-Cholesterol,是一种具有生物活性和细胞膜渗透性的胆固醇类似物,可以被细胞摄取而进入细胞内部,可以对细胞内的胆固醇代谢进行定位示踪,常作为荧光探针用于监测细胞中胆固醇摄取和细胞器间胆固醇通量的研究。
BDPY荧光基团本质上是亲脂性的,所以可以模拟天然脂质的性质。该系列染料在不同生理条件下相对稳定,对环境的极性和pH值相对不敏感,由于其结构具有非对称性,故有多种衍生结构产物,BDPY标记胆固醇即为其中一种。BDPY-Cholesterol (也称BODIPY-Cholesterol)的分子式为C36H51BF2N2O2,分子量为576.6,在被活细胞摄取后,可形成可被激发的二聚体并发射红移荧光,最大激发波长为480nm,最大发射波长为508nm。
胆固醇(Cholesterol),又称胆甾醇,是一种环戊烷多氢菲的衍生物,分子式为C27H46O,分子量为386.65。胆固醇广泛存在于动物体内,尤以脑及神经组织中最为丰富,在肾、脾、皮肤、肝和胆汁中含量也比较高。胆固醇是动物组织细胞不可缺少的重要物质,它不仅是哺乳动物细胞膜的重要组成部分,同时也是合成胆汁酸,维生素D以及甾体激素的重要原料。胆固醇广泛参与胞内转运、细胞信号转导等细胞功能,并维持着膜结构的流动性。
本试剂盒组分齐全,使用便捷。本试剂盒提供的BDPY-Cholesterol为400X储存液,该溶液经过优化,对大多数细胞都适用;阳性对照试剂CholUp是一种胆固醇转运蛋白的抑制剂,可导致胆固醇在细胞内蓄积。同时,本试剂盒也提供了Hoechst 33342染色液,方便同时观察细胞核染色情况。
对于96孔板中的样品,按照每孔使用100μl BDPY-Chol胆固醇摄取工作液计算,本试剂盒的小包装和中包装可以进行1000次和5000次检测;对于6孔板中的贴壁培养细胞样品,按照每孔使用1ml BDPY-Chol胆固醇摄取工作液计算,本试剂盒的小包装和中包装可以进行100次和500次检测;如果用于流式细胞仪检测,按照每个样品的检测体系体积为0.5ml时,本试剂盒的小包装和中包装可以进行200次和1000次检测。