YO-PRO-1染色液(YO-PRO-1 Staining Solution)是一种快速、便捷的用于3D培养的细胞球或类器官等凋亡或坏死细胞的细胞核染色的溶液。仅需染色10分钟就可在荧光显微镜下观察到凋亡或坏死细胞中非常明亮的细胞核绿色荧光染色。
YO-PRO-1,又名恶唑黄(Oxazole yellow),简称YP1,是一种对正常动物细胞膜没有通透性而对于凋亡细胞的细胞膜有通透性的DNA绿色荧光染料,常用于细胞凋亡与坏死的检测。YO-PRO-1是一种非细胞膜穿透性的并对DNA具有高亲和力的羰花青单体绿色荧光染料,在没有与DNA结合的时候基本上没有荧光,而与DNA结合后可以发出明亮的绿色荧光。在细胞凋亡发生时,细胞膜通透性发生改变,此时YO-PRO-1可以进入细胞内与DNA结合,发出明亮的绿色荧光,因此常使用本荧光染料用于分析和鉴定凋亡细胞。需要注意的是YO-PRO-1也能染色细胞膜缺乏完整性的坏死细胞,因此需要和对坏死细胞特异性荧光染色的PI进行双染才能有效判定细胞凋亡。
YO-PRO-1的分子式为C24H29I2N3O,分子量为629.32,CAS号为152068-09-2。YO-PRO-1结合DNA后的最大激发光波长为491nm,最大发射波长为509nm。
YO-PRO-1作为一种细胞凋亡检测的荧光探针,可以应用于大多数的哺乳动物细胞,包括贴壁细胞和悬浮细胞,与传统的Annexin V-FITC检测方法相比,检测准确性和灵敏度相当。YO-PRO-1检测的是细胞凋亡时细胞膜通透性的改变,而Annexin V-FITC检测的是细胞凋亡时细胞膜上的磷脂酰丝氨酸从细胞膜的内膜翻转至外膜。
本产品适用范围广。本产品可用于常规方法培养出的3D细胞球或类器官,包括超低吸附细胞培养板、基质胶或Matrigel包被的平板、琼脂糖包被的平板、细胞悬滴培养板等。
传统的细胞培养大多以二维(Two-dimensional, 2D)的形式展开,但2D培养的细胞在生长方式、生长形态、分化和功能等方面都与体内生理条件下细胞的真实形态和结构存在明显差异,可能会因为细胞结构和组织形态的缺失,使实验结果的可信度降低。三维(Three-dimensional, 3D)细胞培养能够更好地模拟体内细胞生存的微环境,更能代表体内组织,也能更真实的反应细胞与细胞间、细胞与基质间的相互作用,细胞对外源性和内源性刺激的应答也更接近于它们在体内的反应,3D细胞培养从而成为更有价值并更为可信的体外实验模型,能够获得与体内实验更加一致的实验结果。
3D肿瘤细胞模型越来越多地被用于了解疾病机制和药物研发。2D培养的肿瘤细胞,其单侧细胞膜可以均匀地获得营养和氧气,而3D培养的肿瘤细胞团的内部细胞获得营养和氧气的机会更少,形成自然的营养和氧气梯度,能更好地模拟体内微环境条件,因此3D培养的肿瘤球状体(Spheroid)或肿瘤类器官(Organoid)等能更好地模拟体内肿瘤,更利于小分子药物筛选或者肿瘤相关分子机制的研究,也更能准确地预测药物治疗的体内反应、疗效或毒性。同时,2D肿瘤细胞模型体外扩增有一定局限性,在传代后容易丧失原肿瘤的遗传异质性,出现优势克隆选择性,从而降低临床相关性。相比于2D细胞模型,3D细胞球或者类器官很多情况下能提供更可信的研究结果,简化并加速药物评价流程。自2009年小肠类器官首次建立至今,3D细胞和类器官研究已经扩展到很多组织系统,并成为生命科学最热门的领域之一。
按照96孔板每孔100μl YO-PRO-1染色液,本产品每10ml包装可以进行100个样品的检测。
本产品使用便捷,整个检测过程仅需约10-30分钟即可完成。3D细胞球经凋亡诱导等处理后,仅需加入本产品避光孵育10分钟即可进行荧光检测。