真核基因表达调控研究常用的方法是进行报告基因的检测,生物发光法又是报告基因检测最常用的有效手段。萤光素酶能催化底物萤光素的转化,并发射出光子。
该产品为萤火虫萤光素酶报告基因在哺乳动物细胞中的表达提供快速、灵敏、稳定的检测方法。能够检测最低10-20 mol的萤光素酶,在10-14至10-20 mol的酶浓度范围内呈很好的线性关系。萤火虫萤光素酶分子量约61 kDa的蛋白,在ATP、Mg2+和O2存在条件下,催化其底物甲虫萤光素氧化成氧化萤光素并发出波长是560 nm左右的萤光。海肾萤光素酶(Renilla Luciferase)是分子量约36 kDa的蛋白,在O2存在下,催化其底物腔肠素(Coelenterazine)氧化成Coelenteramide并放出波长480 nm左右的萤光。两种萤光均属于化学发光,可以用酶标仪的化学发光检测模块进行测定。
DualFluo萤火虫/海肾萤光素酶双检测试剂盒利用双报告基因检测的方式,其中一种报告基因(如海肾萤光素酶报告基因)可作为内对照,可有效排除因外部因素导致的误差,如细胞数量,细胞状态,移液体积,细胞裂解效率等,以实现对实验数据的准确性和可靠性。本试剂盒主要可以应用于启动子、增强子、转录因子活性研究,miRNA靶向研究,信号通路研究,蛋白质相互作用等。