EGFR 20 号外显子插入突变（exon20ins）占 NSCLC 的 1.8%–3%，却因结构“楔形”障碍对一二代 TKI 几乎天然耐药，中位 PFS 仅 6 个月。Sunvozertinib（DZD9008，CAS 2370013-12-8）凭借“柔性苯胺-丙烯酰胺”双骨架，实现了对突变型 EGFR 的不可逆锁定，同时对野生型抑制减弱 80 倍，为科研场景提供了高窗宽、低毒性、可穿越血脑屏障的探针级分子。本文基于 2025 年最新临床前与临床数据，系统梳理其体外、体内及转化研究范式。
一、分子特性与实验友好度
分子式 C29H34ClN7O3，Mw 548.1，类白色粉末，DMSO 溶解度 15 mg mL⁻¹（≈27 mM），PBS 中 0.3 mg mL⁻¹；4 °C 固态 24 个月稳定，-80 °C 储备液 (10 mM) 可分装冻存 6 个月，冻融 5 次纯度仍 >98%，满足长期细胞与动物实验 。
二、作用机制：立体匹配+共价锁定
结构匹配：二甲氨基吡咯烷侧链伸入 EGFR 疏水溶剂通道，避开野生型 Lys745 空间位阻；
共价键合：丙烯酰胺基团与 Cys797 形成不可逆硫醚键，使 IC50 降至 0.6 nM（exon20ins A767_V769dup），而对 WT-EGFR 仅 51 nM，选择性 >85 倍；
下游阻断：pEGFR、pERK、pAKT 同时下调，半衰期 24 h 以上，一次给药即可维持 >90% 靶点占据 。
三、体外实验方案与关键读数
抑制增殖：Ba/F3 细胞系（EGFR ex20ins A767_V769dup）中，Sunvozertinib 的 GI50 为 2.3 nM；对 WT-Ba/F3 的 GI50 达 180 nM，窗宽 78 倍，适合构建“突变-野生”双荧光竞争模型。
抑制磷酸化：H1975（L858R+T790M）与 H3255（ex20ins）细胞 2 h 给药后，pEGFR 抑制 IC50 分别为 8 nM 与 6 nM；Western blot 可检测到 1 nM 即有显著下调，适用于高通量磷酸化筛选。
逆转耐药：在 ABCB1 过表达的 KB-C2 细胞中，Sunvozertinib 10 μM 可完全逆转紫杉醇耐药，耐药倍数从 120 倍降至 1.2 倍，提示其兼具转运体抑制功能，为联合化疗提供机制依据 。
四、体内模型验证与给药策略
皮下异种移植：PDX 模型（EGFR ex20ins S768_D770dup）口服 5 mg kg⁻¹，qd × 21 d，肿瘤生长抑制率（TGI）达 118%，4/8 只小鼠肿瘤完全消退；同等剂量奥希替尼 TGI 仅 62%。
脑转移模型：采用 Luc-标记的 H3255-LV 细胞颅内注射，Sunvozertinib 15 mg kg⁻¹ 口服，qd × 14 d，生物发光信号下降 92%，中位生存期延长至 45 d（对照 24 d），证明其可穿透血脑屏障并保持活性 。
药代动力学：小鼠 10 mg kg⁻¹ 单次灌胃，Cmax 1.8 μM，T1/2 4.7 h；人源化剂量 300 mg 下，稳态 Cmin 0.7 μM，已覆盖 95% exon20ins 亚型的 pEGFR IC90，为转化研究提供直接桥接 。
五、科研热点方向拓展
单细胞磷酸化组学：Sunvozertinib 处理前后，利用 CyTOF 同时追踪 38 个磷酸化位点，可绘制 EGFR 信号网络重构图谱。
类器官+基质共培养：人源肺腺癌类器官与 CAF 共培养模型中，药物显著下调 IL-6/STAT3 旁分泌轴，为研究肿瘤微环境提供平台。
动态 PET 探针：¹⁸F 标记 Sunvozertinib 衍生物，可在恒河猴实现 EGFR exon20ins 异种瘤的特异性摄取，2 h 肿瘤/肌肉比 6.8，适合非侵入性药效评估。
获得性耐药机制：连续给药 90 d 的 PDX 模型中，已发现 EGFR T854A 与 PIK3CA E545K 双突变克隆，为二代组合策略提供先导信息。
六、实验小贴士
溶剂：推荐 0.5% CMC-Na 悬浊液灌胃，pH 7.4，4 °C 可放 7 d；静脉注射需换用 5% DMSO+10% Solutol+85% PBS，避光。
采血时点：小鼠 PK 实验建议 0.25、0.5、1、2、4、8、24 h；若测脑组织，需心脏灌流 PBS 后再取，避免血液污染。
联合用药：与 Amivantamab 联用可产生左移协同，CI < 0.3；但需下调 Amivantamab 剂量 30%，避免 EGFR 野生型抑制相关皮疹。
结语
从 0.6 nM 的酶学活性，到 60.8% 的确认 ORR，再到 48% 的颅内缓解率，Sunvozertinib 为 EGFR exon20ins 研究提供了兼具“强效-高选-透脑”三重优势的探针级分子。随着 2025 年 NCCN 指南将其列为一线失败后首选 ，抢先布局该化合物的机制与转化研究，无疑将在下一代高分论文与专利赛道占得先机。立即订购高纯度科研级 Sunvozertinib，让您的下一篇 J Clin Oncol 或 Nat Med 从“新”启航！