在分子生物学领域,DNA序列的精准解析与基因突变的快速验证是推动生命科学发展的核心动力。作为Sanger测序法的“灵魂试剂”,ddCTP™(2',3'-二脱氧胞苷-5'-三磷酸)凭借其独特的链终止功能,成为基因测序、突变检测、分子克隆等实验的“黄金标准”,为全球科研人员提供高精度、高可靠性的解决方案。
一、核心机制:链终止的“分子开关”
ddCTP™的分子结构中,核糖的2'和3'位均缺失羟基(-OH),这一关键改造使其在DNA合成过程中成为“精准终止子”。当DNA聚合酶将ddCTP™掺入延伸链时,由于缺乏3'-羟基,无法形成磷酸二酯键,导致链合成立即终止。这一特性使其成为解析DNA序列的“分子标尺”,通过控制ddCTP™与天然dCTP的比例,可生成不同长度的DNA片段,结合荧光标记与毛细管电泳,实现碱基序列的逐一读取。
二、科研应用:多场景覆盖,赋能生命科学全链条
Sanger测序:基因组学的“金标准”基石
ddCTP™是Sanger测序法的核心试剂之一。在人类基因组计划中,ddCTP™参与的测序反应贡献了95%以上的高质量数据,奠定基因组学基础。现代测序仪通过四色荧光标记的ddNTP(含ddCTP™)混合物,可在单次反应中解析数千碱基序列,准确率达99.999%。例如,在新冠病毒基因组测序中,ddCTP™辅助快速解析病毒RNA序列,为疫苗研发提供关键信息。
基因突变检测:精准定位“生命密码”的微小差异
ddCTP™通过设计特异性终止位点,可精准识别单碱基替换、缺失突变等基因变异。在囊性纤维化(CFTR基因)检测中,ddCTP™终止反应可识别单个碱基替换,指导个性化治疗;在肿瘤相关基因突变检测(如EGFR基因21号外显子L858R点突变)中,ddCTP™参与的测序反应可观察链终止片段的长度变化,快速验证突变是否存在。
分子克隆与核酸标记:精细调控DNA合成的“分子剪刀”
ddCTP™可用于制备特定长度的DNA片段(如电泳标准品),通过控制其与dCTP的比例,诱导DNA链在含C的位点随机终止,生成梯度标准品。在核酸原位杂交(FISH)探针制备中,生物素或地高辛标记的ddCTP™可实现对含C位点的特异性标记,标记效率达90%以上,为染色体定位、基因表达原位分析提供精准工具。
CRISPR-Cas9验证:基因编辑的“质量检测员”
结合ddCTP™的测序反应,可快速确认基因编辑位点的插入/缺失(Indel)突变,评估编辑效率。例如,在评估Cas9编辑效率时,ddCTP™参与的测序反应可精准识别编辑位点附近的C碱基分布,判断编辑是否引入非预期的胞嘧啶突变。
三、技术优势:高精度、高兼容、高稳定,定义行业新标准
高精度与可重复性:ddCTP™的链终止效率达99%以上,确保实验结果的一致性。在Sanger测序中,同一模板重复测序的碱基匹配率超过99.9%。
多场景兼容性:支持多种DNA聚合酶(如Taq、Klenow片段)及测序平台(如ABI 3730xl),适配荧光标记、放射性标记或非标记应用,满足不同实验室的设备条件。
长期稳定性:在-20℃下可稳定保存2年,且无放射性危害,符合现代实验室的安全规范。
订购请致电: 400-086-2158
来源:https://www.med-life.cn/product/1073863.html

沪公网安备31011402010657号