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AF350NHS活化酯AlexaFluor350NHSester

目录号: PC21371 纯度: COA
AF350NHS活化酯是生物医学领域中一种重要的荧光标记试剂,其核心由两部分构成:Alexa Fluor 350荧光团与N-羟基琥珀酰亚胺酯(NHS酯)。
AF350NHS活化酯(CAS 200554-19-4)产品图
CAS No. :200554-19-4
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中文名称
AF350NHS活化酯
英文名称
AlexaFluor350NHSester
英文别名
2H-1-Benzopyran-6-sulfonic acid,7-amino-3-[2-[(2,5-dioxo-1-pyrrolidinyl)oxy]-2-oxoethyl]-4-methyl-2-oxo-
Cas No.
200554-19-4
分子式
C16H14N2O9S
分子量
410.36
详情描述

Medlife的AlexaFluor350是一种蓝色荧光染料,是磺酸化的香豆素染料7-AMCC。AlexaFluor350染料用于荧光成像和流式细胞分析中,具有水溶性和pH值不敏感性(pH4–10)。 AlexaFluor350的NHS酯(琥珀酰亚胺活化酯)是最常用的活化官能团,能实现该染料与蛋白、核酸、小分子的酰胺键偶联。NHS酯可用于标记蛋白、胺修饰的寡核苷酸和其他含胺分子的伯胺(R-NH2)。所得AlexaFluor偶联物将显示出比其他光谱相似荧光基团的偶联物更亮的荧光和更高的光稳定性。

性状:灰黄色固体;

溶解度:易溶于水,DMSO,DMF等;

标记对象:氨基;

保存:避光,干燥,-20℃;

相关分类:AF系列(AlexaFluor);AF350;

查询关键词:200554-19-4,AF350NHS活化酯,AlexaFluor350NHSester,PC21371,Medlife。

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Imaging flow cytometry

Nature Reviews Methods Primers 2022. DOI: 10.1038/s43586-022-00182-y 相关性评分:11

该文献为Nature Reviews Methods Primers上关于成像流式细胞术的综述,主题属于流式细胞分析与荧光成像应用范畴,与AF350 NHS活化酯可能用于流式细胞分析的场景有一定关联。但文献未提供摘要和关键词,无法确认其是否明确使用或研究了AF350 NHS活化酯(CAS 200554-19-4)或其直接衍生物,极可能仅泛泛讨论成像流式细胞术方法而非具体染料;也未提供该化合物的光谱数据、标记效率、细胞毒性或光稳定性等关键表征数据,实验模型匹配度低。期刊影响力高,但就目标产品相关性而言整体较弱。

Design, synthesis, and spectroscopic profiling of novel coumarin dyes: Investigating solvent sensitivity and photophysical properties.

Spectrochimica acta. Part A, Molecular and biomolecular spectroscopy 2024. DOI: 10.1016/j.saa.2024.124482 相关性评分:10

该文献设计并合成了四种基于香豆素骨架的新型染料,使用香豆素-3-羧酸琥珀酰亚胺酯与胺反应,但并非目标化合物AF350 NHS活化酯(CAS 200554-19-4,即Alexa Fluor 350 NHS酯,一种磺酸化7-AMCC衍生物)。文献仅涉及同类香豆素染料,未使用或研究目标化合物或其直接衍生物,故化合物匹配度极低(1分)。应用场景为溶剂敏感性、光物理性质及二氧化硅纳米颗粒相互作用研究,与产品描述的蛋白/核酸标记、细胞成像、流式细胞术等典型生物应用契合度低(2分)。实验模型为溶剂和PMMA薄膜、Ludox二氧化硅纳米颗粒,不涉及细胞或动物模型,与产品预期生物应用领域不一致(2分)。方法学上提供了UV、荧光、TCSPC、TRES、量子产率、寿命等光谱数据,但缺乏目标化合物的标记效率、细胞毒性或光稳定性等关键表征,严谨性中等(3分)。期刊为Spectrochimica Acta Part A,影响力一般,研究创新性有限(2分)。总分10分。

Synthesis of a novel water-soluble pyridine dicarboxylate and its application in fluorescence cell imaging

Heterocyclic Communications 2024. DOI: 10.1515/hc-2022-0178 相关性评分:11

该文献合成并研究了一种新型水溶性吡啶二羧酸酯季铵盐化合物,用于荧光细胞成像,与目标产品AF350 NHS活化酯(一种磺酸化香豆素染料的NHS酯)在化学结构上完全不同。文献未使用或研究AF350 NHS酯或其直接衍生物,仅涉及荧光细胞成像这一宽泛应用场景,与产品分类描述中的细胞成像有部分契合,但未涉及蛋白/核酸标记、流式细胞术等具体应用。实验使用4T1细胞系,与产品预期应用领域(细胞成像)一致,但缺乏与AF350相关的光谱数据、标记效率、光稳定性等关键表征。期刊影响力一般,创新性有限。总体相关性低。

Water‐Soluble Fluorescent Polymer Dyes with Tunable Emission Spectra for Flow Cytometry Applications

Angewandte Chemie International Edition 2024. DOI: 10.1002/anie.202402616 相关性评分:14

该文献开发了基于聚芴的荧光聚合物染料用于流式细胞术,并未使用或研究目标化合物AF350 NHS活化酯(CAS: 200554-19-4),也未涉及任何香豆素类染料或AF350的直接衍生物,因此化合物匹配度极低(1分)。应用场景为流式细胞术,与产品描述中的流式细胞分析部分相关,但染料类型完全不同,故应用相关性中等(3分)。实验模型涉及抗体偶联和细胞染色,与产品预期应用领域(蛋白标记、流式)有一定一致性(3分)。文献未提供AF350的光谱数据、标记效率、细胞毒性或光稳定性等关键表征,方法学严谨性仅针对其自身聚合物染料,对目标产品无参考价值(2分)。期刊为Angewandte Chemie International Edition,影响力极高,研究创新性强(5分)。总体而言,该文献与目标产品相关性很低,仅可作为流式应用场景的间接参考。

Fluorescence-based multifunctional light sheet imaging flow cytometry for high-throughput optical interrogation of live cells

Communications Physics 2024. DOI: 10.1038/s42005-024-01522-y 相关性评分:13

该文献描述了一种基于光片成像的流式细胞术系统(M3IC),用于活细胞的高通量荧光成像和生物物理参数分析,涉及多色荧光成像和癌细胞研究。然而,文献摘要中并未提及使用AF350NHS活化酯或任何具体荧光染料(如AlexaFluor350),仅泛泛提及多色成像能力,因此化合物匹配度极低(1分)。应用场景为荧光成像和流式细胞术,与产品分类描述有一定相关性(3分)。实验模型使用癌细胞,与产品预期应用领域部分一致(3分)。文献未提供目标化合物的光谱数据、标记效率等关键表征,方法学严谨性不足(2分)。期刊Communications Physics影响力较好(4分)。总体而言,文献未真正使用目标化合物,仅涉及同类荧光成像技术,相关性有限。

Water‐Soluble Luminescent Trityl Radical for Fluorescence/Magnetic Resonance Dual‐Modal Imaging Probe

Advanced Science 2026. DOI: 10.1002/advs.77710 相关性评分:11

该文献研究的是水溶性三苯甲基(TTM)自由基TTM-trisTP3B和TTM-trisTP9B,作为荧光/磁共振双模态成像探针,与目标产品AF350 NHS活化酯(磺化香豆素类染料,用于标记伯胺)在化学结构、荧光机制和应用目的上完全不同。文献未使用、未提及AF350或任何AlexaFluor350衍生物,也未涉及NHS酯偶联标记。虽然涉及细胞荧光成像和探针应用,与荧光成像领域有部分重叠,但具体应用场景(TTM自由基双模态探针)与AF350的蛋白/核酸/小分子胺标记用途契合度低;实验模型仅为活细胞摄取与定位,未涉及AF350预期的标记体系;方法学上未提供AF350相关光谱、标记效率、细胞毒性或光稳定性数据。期刊Advanced Science影响力较高,但与本产品相关性极低,综合评分低。

1:一般建议:溶解度为Medlife测试数据,可能与文献描述存在差异。这是由于生产工艺和批次不同产生的正常现象。为了使其更好的溶解,请用37℃加热试管并在超声波水浴中震动片刻。不同批次产品溶解度各有差异,仅做参考,具体以实验方案为准。

2:储存条件:粉末-20°C一般情况可以保存3年,溶于溶剂-80°C一般情况可以保存1年。不同产品及不同批次产品可能存在差异,请细致阅读产品信息,并辅助参考相关文献描述。

概述

AF350NHS活化酯(Alexa Fluor 350 NHS Ester)是一种蓝色荧光染料,属于磺酸化香豆素类染料(7-AMCC)。该染料具有优异的水溶性和pH不敏感性(pH 4-10),适用于荧光成像和流式细胞分析。其NHS酯(琥珀酰亚胺活化酯)形式可用于标记蛋白质、核酸、小分子等含伯胺(-NH2)的分子,形成稳定的酰胺键。与光谱相似的其它荧光基团偶联物相比,AF350偶联物表现出更亮的荧光和更高的光稳定性。

理化性质

  • 外观:灰黄色固体
  • 溶解性:易溶于水、DMSO、DMF等极性溶剂
  • 荧光特性:激发/发射波长(约)346 nm / 442 nm(具体数值可能因仪器和溶剂略有差异)
  • pH稳定性:在pH 4-10范围内荧光不受pH影响
  • 反应基团:NHS酯(琥珀酰亚胺活化酯),可与伯胺反应形成酰胺键
  • 标记对象:含伯胺的分子(如蛋白质、胺修饰的寡核苷酸等)
  • 储存条件:避光、干燥、-20°C保存

应用领域

  • 荧光成像:用于细胞或组织标记的蓝色荧光检测
  • 流式细胞分析:作为多色流式 panel 中的蓝色荧光探针
  • 蛋白质标记:标记抗体、酶等蛋白质的伯胺基团,用于免疫荧光、Western blot等
  • 核酸标记:标记胺修饰的寡核苷酸,用于FISH、qPCR等
  • 小分子标记:标记含胺的小分子化合物,用于示踪或分析
  • 其他:适用于需要水溶性、pH不敏感荧光标记的实验体系

实验方案建议

1. 储备液配制

  • 将AF350NHS活化酯溶于无水DMSO或DMF,配制成10 mM储备液(建议现配现用,避免反复冻融)。
  • 溶液应避光保存,短期内可置于-20°C。

2. 标记反应(以蛋白质为例)

  • 将目标蛋白溶解于pH 7.5-8.5的缓冲液中(如PBS或碳酸氢钠缓冲液),避免使用含伯胺的缓冲液(如Tris、甘氨酸)。
  • 按摩尔比(染料:蛋白)1:1至10:1加入AF350NHS储备液,轻柔混匀。
  • 室温避光反应1-2小时,或4°C过夜。

3. 纯化

  • 反应结束后,可通过凝胶过滤(如Sephadex G-25)、透析或超滤去除游离染料。
  • 纯化后的偶联物应避光保存于4°C(短期)或-20°C(长期,添加甘油防冻)。

4. 验证

  • 使用紫外-可见分光光度计测定偶联物的染料/蛋白比(DOL)。
  • 通过荧光光谱或功能实验验证标记效果。

注意事项

  • 反应体系避免含有氨基的缓冲液(如Tris、甘氨酸)。
  • 染料对光敏感,所有操作尽量避光。
  • NHS酯易水解,储备液应避免水分,现配现用。

储存条件

  • 粉末形式:避光、干燥、-20°C保存,有效期通常为12个月(具体以产品标签为准)。
  • 储备液:溶解后应分装避光保存于-20°C(建议用无水DMSO或DMF),避免反复冻融。
  • 运输条件:室温或低温运输,避光防潮。

相关产品推荐

  • AF系列其他染料:AF350 NHS酯的类似物(如AF488、AF594 NHS酯),用于多色荧光标记。
  • 胺反应性标记试剂盒:包含AF350 NHS酯及纯化柱的完整标记试剂盒。
  • 胺修饰寡核苷酸:用于与AF350 NHS酯偶联的定制或标准品。
  • 荧光标记蛋白标准品:预标记的AF350蛋白,用于流式或成像对照。
  • 相关分类:AF系列(Alexa Fluor);AF350。

(以上产品信息仅供参考,具体产品请咨询Medlife或授权代理商。)

Q1:AF350 NHS活化酯的荧光激发和发射波长是多少?适合哪些检测仪器?

AF350 NHS活化酯的激发波长约为346 nm,发射波长约为442 nm,属于蓝色荧光染料。该染料具有水溶性和pH不敏感性(pH 4-10),适用于荧光成像和流式细胞分析。具体波长可能因仪器和溶剂略有差异,建议查看产品说明书或COA确认。

Q2:AF350 NHS活化酯用什么溶剂配制储备液?浓度多少合适?

建议使用无水DMSO或DMF配制储备液,通常可配制成10 mM浓度,现配现用以避免水解。溶解前请确保溶剂无水,配制后避光保存。具体浓度可根据标记实验需求调整,参考产品说明书或联系技术支持获取建议。

Q3:AF350 NHS活化酯粉末和储备液分别怎么保存?能反复冻融吗?

粉末应避光、干燥、-20°C保存,有效期通常为12个月(以标签为准)。储备液需分装避光保存于-20°C,避免反复冻融,否则NHS酯易水解失活。建议现配现用,短期内可置于-20°C。

Q4:如何确认AF350 NHS活化酯的纯度和活性?有质检报告吗?

每批产品均提供COA,包含纯度、活性等质检数据。您可查看COA中的HPLC纯度、NHS酯含量等信息。若需进一步验证,可通过紫外-可见分光光度计测定染料浓度,或进行标记实验评估活性。具体质检指标请以COA为准。

Q5:用AF350 NHS活化酯标记蛋白质时,染料与蛋白的摩尔比多少合适?

推荐染料:蛋白摩尔比范围为1:1至10:1,具体比例需根据蛋白性质和标记程度优化。建议先进行小规模预实验,通过测定DOL(染料/蛋白比)确定最佳比例。反应缓冲液需避免含伯胺(如Tris、甘氨酸),pH控制在7.5-8.5。

Q6:AF350 NHS活化酯标记反应后如何纯化偶联物?

反应结束后,可通过凝胶过滤(如Sephadex G-25)、透析或超滤去除游离染料。纯化后偶联物应避光保存于4°C(短期)或-20°C(长期,添加甘油防冻)。纯化效果可通过荧光光谱或功能实验验证。

Q7:AF350 NHS活化酯运输条件是什么?需要冷链吗?

该产品通常室温或低温运输,避光防潮即可。具体运输条件可能因包装和季节调整,请以产品标签或说明书为准。收到后应按照推荐条件(避光、干燥、-20°C)保存。

Q8:AF350 NHS活化酯操作时有哪些安全注意事项?

操作时应佩戴手套、实验服和护目镜,避免吸入或皮肤接触。染料对光敏感,所有操作尽量避光。NHS酯遇水易水解,避免潮湿环境。废弃物料按当地法规处理。具体安全信息请参考MSDS或联系技术支持。

技术文章2026-10-27

AF350 NHS活化酯:磺酸化香豆素荧光标记试剂的研究背景与最新进展

AF350 NHS活化酯(CAS 200554-19-4)是一种基于磺酸化7-氨基-4-甲基香豆素(7-AMCC)骨架的蓝色荧光染料衍生物,其NHS酯基团可与含伯胺的蛋白、核酸及小分子形成稳定酰胺键。本文从香豆素染料的光物理基础出发,综述了AF350 NHS酯的化学设计原理、标记化学特性及近年来在荧光成像与流式分析中的应用进展,并结合同类香豆素染料的光谱研究讨论了其水溶性、pH不敏感性及光稳定性优势。文章还分析了该试剂在抗体标记、寡核苷酸偶联及多色荧光panel构建中的适用场景,并对其在超分辨成像、活细胞标记及定量流式中的潜在发展方向进行了展望,旨在为相关领域研究者提供系统的技术参考。

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