HER2 激活突变约占非小细胞肺癌（NSCLC）2–4%，其中 90% 以上为外显子 20 插入（exon20ins）。传统泛-HER 抑制剂因同时对 EGFR 产生抑制，导致皮疹、腹泻等剂量限制性毒性，而 ADC 类药物则面临间质性肺炎风险。Zongertinib（代号 BI 1810631，CAS 2728667-27-2）凭借“不可逆结合+EGFR 豁免”双重设计，在酶学、细胞及动物层面均显示出 >25 倍的 HER2/EGFR 选择性，成为目前科研场景中最受关注的 HER2 探针分子。本文结合 2025 年最新临床前与早期临床数据，系统梳理其体外、体内及转化研究范式。

一、分子特性与实验友好度
化学式 C29H29N7O2，分子量 535.6，类白色粉末；DMSO 溶解度 31.25 mg mL⁻¹（58 mM，60 °C 超声助溶），PBS 中 0.3 mg mL⁻¹；粉末 -20 °C 密封干燥 3 年稳定，储备液 -80 °C 可冻存 6 个月，冻融 5 次纯度仍 >98%，满足长期细胞与动物实验 。

二、作用机制：共价锁定+EGFR 豁免
结构匹配：丙烯酰胺弹头与 HER2 Cys805 形成不可逆硫醚键，对野生型及 14 种临床热点突变均保持 nM 级效力；
选择性来源：EGFR 对应位点为 Ser783，无法形成关键氢键，因此 Zongertinib 对 EGFRwt IC50 高达 579 nM，窗宽 >44 倍；
下游阻断：pHER2、pAKT、pERK 同步下调，24 h 内靶点占据率 >90%，为“长冲洗”实验提供方便 。

三、体外实验方案与关键参数
抑制增殖：
　• BA/F3-HER2WT：GI50 = 1 nM
　• BA/F3-YVMA（最常见 exon20ins）：GI50 = 16 nM
　• BA/F3-EGFR 依赖：GI50 = 1540 nM
　窗宽达 96 倍，适合构建“突变-野生”双荧光竞争模型。
抑制磷酸化：NCI-H2170（HER2 amp）2 h 给药后，pHER2 IC50 = 6 nM；对 EGFR 高表达 A431 细胞 >5000 nM 无显著抑制，证明 EGFR 豁免。
脑转移模型：hCMEC/D3 血脑屏障单层渗透实验显示，Zongertinib 表观渗透系数 (Papp) 18.3 × 10⁻⁶ cm s⁻¹，高于拉帕替尼 3 倍，为颅内疗效研究提供依据 。

四、体内模型验证与给药策略
皮下异种移植：
　• PDX 模型（HER2 A775_G776insYVMA）口服 0.3 mg kg⁻¹，qd × 21 d，TGI = 118%，4/8 只小鼠肿瘤完全消退；
　• 同等剂量波齐替尼 TGI 仅 62%，且出现 15% 体重下降，Zongertinib 无体重变化。
脑转移模型：采用 Luc-标记的 NCI-H2170 细胞颅内注射，Zongertinib 15 mg kg⁻¹ 口服，qd × 14 d，生物发光信号下降 94%，中位生存期延长至 46 d（对照 24 d）；颅内 ORR 41%，与临床数据高度一致 。
药代动力学：小鼠 10 mg kg⁻¹ 单次灌胃，Cmax = 1.2 μM，T1/2 = 42 h；人源化剂量 120 mg 下，稳态 Cmin = 0.8 μM，已覆盖 99% HER2 突变细胞的 pIC90，为转化研究提供直接桥接 。

五、科研热点方向拓展
获得性耐药机制：持续给药 90 d 的 PDX 模型中，已发现 HER2 T798I 与 PIK3CA E545K 双突变克隆，为二代组合策略提供先导信息；
单细胞磷酸化组学：CyTOF 同时追踪 38 个磷酸化位点，可绘制 HER2 抑制后信号网络重构；
类器官+基质共培养：人源肺腺癌类器官与 CAF 共培养模型中，Zongertinib 显著下调 IL-6/STAT3 旁分泌轴，为研究肿瘤微环境提供平台；
动态 PET 探针：¹⁸F 标记衍生物在恒河猴实现 HER2 异种瘤特异性摄取，2 h 肿瘤/肌肉比 6.8，适合非侵入性药效评估。

六、实验小贴士
溶剂：推荐 0.5% CMC-Na 悬浊液灌胃，pH 7.4，4 °C 可放 7 d；静脉注射需换用 10% DMSO+20% SBE-β-CD+70% saline，避光。
采血时点：小鼠 PK 实验建议 0.25、0.5、1、2、4、8、24、48 h；若测脑组织，需心脏灌流 PBS 后再取，避免血液污染。
联合用药：与曲妥珠单抗联用可产生左移协同，使 GI50 降低 3 倍；但需下调曲妥珠剂量 30%，避免心脏毒性。

从 1 nM 的酶学活性，到 0.3 mg/kg 的体内完全缓解，再到 41% 的颅内 ORR，Zongertinib 为 HER2 突变型 NSCLC 研究提供了兼具“强效-高选-透脑”三重优势的探针级分子。随着 2025 年 FDA 加速批准其上市 ，抢先布局该化合物的机制与转化研究，无疑将在下一代高分论文与专利赛道占得先机。立即订购高纯度科研级 Zongertinib，让您的下一篇 Nat Med 或 Cancer Discov 从“新”开始！