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发布日期:2025/12/16 15:22:00

名称:LB肉汤培养基 
品牌: Medlife
货号:PC22022
规格:250g
 

LB肉汤培养基(Luria-Bertani Broth)自20世纪50年代由贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)发明以来,凭借其营养均衡、操作简便的特性,迅速成为微生物学、基因工程及生物化学领域的核心培养基。其名称源于英语“lysogeny broth”(溶菌肉汤),最初用于研究噬菌体与宿主菌的相互作用,如今已扩展至大肠杆菌工程菌扩增、蛋白表达优化及抗生素筛选等多元化场景。本文将从配方设计、应用场景及技术优化三方面,解析LB肉汤培养基的科研价值。

 

配方设计:营养均衡与渗透压调控的平衡

LB肉汤培养基的核心成分包括胰蛋白胨、酵母提取物和氯化钠(NaCl),三者协同构建微生物生长所需的微环境:

胰蛋白胨:由新鲜牛肉和牛骨经胰酶消化制成,富含氮源、氨基酸及维生素,为微生物提供碳骨架和能量代谢原料。
酵母提取物:通过破壁与酶解工艺提取,含30%以上氨基酸、50%总蛋白及10%核苷酸,补充生长因子与维生素B族,促进细胞分裂。
氯化钠:维持渗透压平衡(浓度1%),避免细胞因吸水膨胀或失水皱缩,同时提供钠、氯离子等无机盐。
配方优化案例:在反式-2-癸烯酸生物合成研究中,研究人员通过调整LB培养基的初始pH值(6.8)、诱导温度(30℃)及乳糖浓度(5 g/L),使重组大肠杆菌的产物产量提升至2.002 g/L,较传统配方提高2.1倍。这一优化策略基于Logistic生长模型与Luedeking-Piret产物生成模型,通过响应面法精准调控关键参数,凸显了配方设计对代谢途径的调控作用。

 

应用场景:从基础研究到工业生产的跨越

1. 基因工程菌扩增与质粒提取

LB肉汤培养基是分子生物学实验的“标准配置”。以大肠杆菌为例,其携带的pUC19、pET系列质粒需通过LB培养基扩增至10⁹ CFU/mL以上,方可满足后续酶切、连接及转化需求。实验流程如下:

接种:将单菌落接入含50 μg/mL氨苄青霉素的LB液体培养基,37℃、200 rpm振荡培养12-16小时;
扩增:按1%接种量转接至新鲜LB培养基,继续培养至OD₆₀₀达0.6-0.8(对数生长期);
收获:离心收集菌体,用于质粒提取或蛋白表达。

2. 蛋白表达优化与纯化

在pET表达系统中,LB培养基通过调整碳源与诱导条件,可显著提升目标蛋白产量。例如,研究显示,将诱导温度从37℃降至25℃,并延长诱导时间至8小时,可使重组人CXCL10蛋白的溶解性提高40%,减少包涵体形成。此外,通过在LB培养基中添加0.5%葡萄糖,可抑制基础表达泄漏,降低细胞代谢负担。

3. 抗生素敏感性测试与筛选

LB肉汤培养基的均一性使其成为抗生素最小抑菌浓度(MIC)测定的理想介质。以卡那霉素为例,将测试菌株接种至含梯度浓度(0-100 μg/mL)卡那霉素的LB培养基中,37℃培养24小时后,通过浊度分析确定MIC值。该方法被广泛应用于临床耐药菌检测及新药研发。

 

技术优化:从实验室到工业化的突破

1. 自诱导培养基的革新

传统LB培养基需手动添加诱导剂(如IPTG),而自诱导LB培养基通过整合乳糖操纵子与葡萄糖抑制机制,实现诱导剂与菌体生长的同步调控。例如,在反式-2-癸烯酸发酵中,研究人员采用自诱导LB培养基,使重组大肠杆菌在72小时后自动启动目标基因表达,避免人工诱导的时机误差,最终产量提升至2.195 g/L。

2. 树脂吸附技术减轻产物抑制

针对代谢产物反馈抑制问题,LB培养基可与离子交换树脂(如D303碱性阴离子交换树脂)联用,通过原位分离(ISPR)技术实时移除产物。在反式-2-癸烯酸合成中,树脂吸附使产物浓度降低80%,发酵周期延长至96小时,产量较传统工艺提高1.5倍。

 

LB肉汤培养基以其简洁的配方与广泛的适用性,成为连接基础研究与工业生产的桥梁。从基因克隆到蛋白表达,从抗生素筛选到代谢工程,其技术优化不断推动生物制造的边界。未来,随着合成生物学与人工智能的融合,LB培养基的定制化设计(如pH动态调控、营养组分精准配比)将进一步释放其潜力,为生命科学领域提供更高效的工具平台。

订购:400-086-2158

来源:https://www.med-life.cn/product/1296299.html

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