您当前的位置:
动态
发布日期:2025/12/5 15:48:00

4-Aminophenylphosphorylcholine(4-APPC,CAS号102185-28-4)是一种基于磷脂酰胆碱结构修饰的生化探针,其分子式为C₁₁H₁₉N₂O₄P,分子量274.25 g/mol。该化合物通过在磷脂酰胆碱的芳香环上引入氨基基团,显著提升了其反应活性与生物相容性,成为研究磷脂酶D(PLD)活性、构建亲和纯化柱及探索脂质信号通路的核心工具。本文系统梳理其在酶动力学分析、蛋白质-配体相互作用研究及细胞信号转导机制解析中的技术优势,揭示其作为“分子开关”在生命科学中的多重价值。

 

分子特性:结构修饰与功能优化的完美结合

4-APPC的分子结构由三部分组成:

磷脂酰胆碱核心:保留磷脂酶D(PLD)的天然底物结构(甘油骨架、磷酸基团及胆碱基团),确保酶催化反应的特异性。
4-氨基苯基修饰:在磷脂酰胆碱的芳香环上引入氨基基团(-NH₂),形成稳定的共轭体系,显著提升化合物的水溶性(溶解度>10 mg/mL)及反应活性。
季铵盐结构:胆碱基团中的氮原子通过甲基化形成季铵盐(N⁺(CH₃)₃),增强分子极性,促进其与带负电的酶活性位点结合。
该化合物以白色至浅灰色固体形式存在,纯度≥99%(HPLC验证),在-20℃条件下可稳定保存2年,支持大规模实验与长期研究。

 

科研应用:从酶动力学到细胞信号的全面覆盖

1. 磷脂酶D(PLD)活性研究:酶动力学分析的“金标准”

PLD是催化磷脂酰胆碱水解生成磷脂酸(PA)和胆碱的关键酶,其活性异常与癌症、炎症及神经退行性疾病密切相关。4-APPC作为PLD的特异性底物,可通过以下机制解析酶动力学参数:

反应原理:PLD催化4-APPC水解,生成4-氨基苯基磷酸(4-APP)和胆碱,其中4-APP在293 nm波长下具有特征吸收峰,可通过分光光度法定量检测。
实验设计:在反应体系中加入不同浓度4-APPC(0.1-100 μM),测定PLD催化反应速率,绘制Michaelis-Menten曲线,计算Km(米氏常数)和Vmax(最大反应速率)。
应用案例:在研究乳腺癌细胞中PLD2过表达机制时,4-APPC标记显示,与正常细胞相比,癌细胞PLD2的Km值降低40%,Vmax值提升3倍,揭示其高活性与肿瘤侵袭性相关。
2. 亲和纯化柱构建:蛋白质-配体相互作用的“分子捕手”

4-APPC可通过共价键与琼脂糖凝胶(Sepharose)或硅胶颗粒偶联,生成特异性吸附剂,用于纯化磷脂酰胆碱结合蛋白(PCBPs)或PLD:

偶联方法:将4-APPC的氨基基团与凝胶表面的环氧基团反应,形成稳定共价键,偶联效率>90%。
纯化流程:将细胞裂解液通过4-APPC偶联柱,目标蛋白(如PLD或PCBPs)因与磷脂酰胆碱结构特异性结合而被吸附,经高盐缓冲液洗脱后,纯度可达95%以上。
应用案例:在纯化大鼠血清中的磷脂酰胆碱结合蛋白时,4-APPC柱纯化效率较传统离子交换柱提升2倍,且目标蛋白活性保留完整。
3. 脂质信号通路研究:细胞信号转导的“荧光探针”

4-APPC可作为荧光标记前体,通过化学修饰引入荧光基团(如FITC或Cy3),实时追踪磷脂酰胆碱在细胞内的代谢动态:

标记原理:4-APPC被细胞摄取后,经PLD催化生成4-APP,后者与荧光探针共价结合,发出特征荧光信号(发射波长520 nm)。
应用场景:在研究巨噬细胞吞噬作用时,4-APPC标记显示,脂多糖(LPS)刺激后,细胞内磷脂酰胆碱代谢速率提升5倍,磷脂酸(PA)水平显著升高,揭示PLD在炎症反应中的调控作用。

 

技术优势:从实验室到产业化的桥梁

操作简便性:4-APPC以粉末形式提供,可直接溶解于水或缓冲液,无需复杂预处理。推荐工作浓度为0.1-100 μM,适用于酶动力学分析、亲和纯化及细胞实验。
合规性支持:产品符合科研级标准(纯度≥99%,HPLC验证),提供完整COA(含NMR、质谱结构确认)和SDS文件,助力药证申报与论文发表。
成本效益:10 mg规格售价约120美元,100 mg规格售价850美元,性价比显著优于同类进口试剂。

 

分子工具,点亮生命科学未来

4-Aminophenylphosphorylcholine凭借其独特的结构修饰、高反应活性及优异的生物相容性,已成为磷脂酶D研究、蛋白质纯化及脂质信号通路解析的核心工具。从酶动力学分析到细胞信号转导,从癌症机制研究到药物筛选,其应用边界正不断拓展。随着单细胞测序技术与活细胞成像技术的发展,4-APPC有望在精准医学中发挥更重要作用,为疾病治疗提供新策略。

 

订购信息:

品牌: Medlife
货号:PC17205
产品名称:4-Aminophenylphosphorylcholine
CAS号:102185-28-4
纯度:≥99%(HPLC)
规格:5 mg、10 mg、25 mg
应用场景:PLD活性研究、蛋白质纯化、脂质信号通路分析

 

订购渠道:https://www.med-life.cn/product/521.html

订购请致电 : 400-086-2158

上一篇:Luteolin(木犀草素):天然黄酮的“多靶点调控”与科研应用突破 下一篇:DZNep HCl——表观遗传调控与抗肿瘤研究的“双效利器”