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发布日期:2025/11/4 16:33:00

名称:ddCTP 
品牌: Medlife
货号:PC13231
规格:100ul (100 mM)/价格:¥3535.00
规格:50ul (100 mM)/价格:¥1949.00
规格:10ul (100 mM)/价格:¥458.00
链接:https://www.med-life.cn/product/1073863.html

 

在基因测序、突变检测与分子克隆领域,如何实现DNA合成的精准控制始终是核心技术挑战。作为双脱氧核苷三磷酸(dideoxynucleoside triphosphate)家族的代表,ddCTP(双脱氧胞苷三磷酸)凭借其独特的链终止特性,已成为生命科学研究中不可或缺的“分子工具”,推动着基因组学、疾病诊断与合成生物学的前沿突破。

 

一、分子机制:ddCTP如何实现DNA合成的“精准刹车”

DNA聚合酶在延伸DNA链时,依赖脱氧核苷三磷酸(dNTP)作为底物,通过磷酸二酯键连接核苷酸。而ddCTP的分子结构中,3'位羟基(-OH)被氢原子(-H)取代,导致其无法与下一个核苷酸形成磷酸二酯键,从而强制终止DNA链的延伸。

核心作用机制:

链终止特异性:ddCTP仅在互补碱基配对(与G配对)时被DNA聚合酶识别并掺入,确保终止位点的精确性。例如,在Sanger测序中,通过控制ddCTP与其他dNTP的比例,可生成不同长度的DNA片段,实现碱基序列的逐一读取。
竞争抑制效应:ddCTP与天然dCTP竞争结合DNA聚合酶活性位点,其高亲和力使其在低浓度下即可有效终止反应,减少非特异性终止。
标记与检测兼容性:ddCTP可被荧光标记(如ddCTP-FAM),与自动化测序仪结合,实现高通量、高灵敏度的基因分型。

 

二、科研应用:ddCTP在多领域的前沿突破

1. Sanger测序:基因组学的“金标准”基石

自1977年Sanger测序法问世以来,ddCTP始终是该技术的核心试剂。通过四色荧光标记的ddNTP(含ddCTP)混合物,现代测序仪可在单次反应中解析数千碱基序列,准确率达99.999%。例如:

人类基因组计划:ddCTP参与的Sanger测序贡献了95%以上的高质量数据,奠定基因组学基础。
病原体检测:在新冠病毒基因组测序中,ddCTP辅助快速解析病毒RNA序列,为疫苗研发提供关键信息。
2. 基因突变检测:精准医疗的“分子探针”

ddCTP通过设计特异性终止位点,可精准定位基因突变。例如:

点突变分析:在囊性纤维化(CFTR基因)检测中,ddCTP终止反应可识别单个碱基替换,指导个性化治疗。
微卫星不稳定性(MSI)检测:通过ddCTP终止不同重复单元的延伸,评估结直肠癌等肿瘤的遗传易感性。
3. 分子克隆与基因编辑:合成生物学的“工具箱”

定向克隆:ddCTP终止反应可生成平末端或粘性末端DNA片段,简化载体构建流程。例如,在pET质粒系统中,ddCTP辅助的PCR产物可直接与线性化载体连接,提高克隆效率。
CRISPR-Cas9验证:结合ddCTP的测序反应,可快速确认基因编辑位点的插入/缺失(Indel)突变,评估编辑效率。
4. 核酸标记与结构研究:揭示生命分子的“动态密码”

荧光原位杂交(FISH):ddCTP标记的探针可特异性结合染色体区域,用于细胞遗传学分析。
RNA结构解析:通过ddCTP终止转录反应,结合化学探针技术,可绘制RNA二级结构,揭示其调控功能。

 

三、技术优势:ddCTP为何成为科研首选?

高精度与可重复性:
ddCTP的链终止效率达99%以上,确保实验结果的一致性。例如,在Sanger测序中,同一模板重复测序的碱基匹配率超过99.9%。
兼容性与灵活性:
可与多种DNA聚合酶(如Taq、Klenow片段)及测序平台(如ABI 3730xl)兼容,支持从基础研究到临床诊断的全流程应用。
安全性与稳定性:
ddCTP在-20℃下可稳定保存2年,且无放射性危害,符合现代实验室的安全规范。

 

四、未来展望:ddCTP驱动的生命科学新范式

随着单分子测序、空间组学等技术的兴起,ddCTP的应用场景正不断拓展。例如:

长读长测序:结合ddCTP的终止特性与纳米孔技术,可实现高精度长片段测序,解决复杂基因组重复区域的分析难题。
表观遗传学研究:通过ddCTP标记的甲基化特异性测序,可绘制全基因组甲基化图谱,揭示表观遗传调控机制。

 

订购:400-086-2158

来源:https://www.med-life.cn/product/1073863.html

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