在分子克隆、DNA 测序、基因突变检测等核酸研究领域，双脱氧核苷酸（ddNTP）凭借其 “终止 DNA 链延伸” 的独特功能，成为解析核酸序列、验证基因结构的核心工具。其中，ddCTP（双脱氧胞苷三磷酸，2',3'-Dideoxycytidine 5'-Triphosphate） 作为针对胞嘧啶（C）的特异性链终止核苷酸，以高纯度、高反应活性及良好的适配性，成为科研人员开展 Sanger 测序、定点突变验证、分子标记等实验的 “精准试剂”，为从基因序列解析到突变机制研究的多场景需求提供关键支持。​

三大核心科研场景，释放 ddCTP 应用价值​
Sanger 测序的 “胞嘧啶终止探针”：在经典 Sanger 双脱氧链终止法测序中，ddCTP 是精准识别 DNA 序列中胞嘧啶位点的核心组分。测序反应体系中，ddCTP 与 dCTP 竞争掺入延伸的 DNA 链，当 ddCTP 掺入时，因缺乏 3'- 羟基（-OH）无法形成磷酸二酯键，DNA 链延伸随即终止 —— 通过荧光标记 ddCTP（如 FAM、TAMRA 标记），结合 capillary 电泳分离，可精准定位序列中所有胞嘧啶（C）的位置。例如，在基因克隆验证实验中，对重组质粒插入片段进行 Sanger 测序时，含 ddCTP 的测序反应可清晰识别插入序列中 C 的分布，测序准确率达 99.99%，且读长可达 500-1000bp，足以覆盖多数基因编码区，为验证克隆序列正确性、排除碱基错配提供直接依据。​
基因突变检测的 “位点验证工具”：在点突变、缺失突变等基因变异分析中，ddCTP 可用于特异性验证含胞嘧啶位点的突变。例如，在肿瘤相关基因突变检测（如 EGFR 基因 19 号外显子缺失、21 号外显子 L858R 点突变）中，针对疑似突变区域设计引物，通过 “ddCTP 终止实验”（即仅添加 ddCTP 与其他 dNTP 的测序反应），可观察链终止片段的长度变化：若目标位点存在 C→T 突变，原本应插入 ddCTP 的位置将因碱基互补配对改变（G 与 C 配对变为 G 与 T 配对），导致链终止片段长度偏移，结合电泳或质谱检测可快速验证突变是否存在。此外，在 CRISPR/Cas9 基因编辑效率评估中，ddCTP 参与的测序反应可精准识别编辑位点附近的 C 碱基分布，判断编辑是否引入非预期的胞嘧啶突变，为基因编辑实验的精准质控提供支持。​
分子克隆与核酸标记的 “精准调控试剂”：在体外 DNA 合成、核酸探针制备等实验中，ddCTP 可用于调控 DNA 链长度或实现特异性标记。例如，在制备特定长度的 DNA 片段（如用于电泳标准品的短链 DNA）时，通过控制 ddCTP 与 dCTP 的比例（如 1:10、1:20），可诱导 DNA 链在含 C 的位点随机终止，生成一系列不同长度的片段，经纯化后即可作为梯度标准品；在核酸原位杂交（FISH）探针制备中，将生物素或地高辛标记的 ddCTP 掺入 DNA 链，可实现对含 C 位点的特异性标记，标记效率达 90% 以上，且标记后的探针与靶序列结合特异性高（非特异性结合率＜5%），为染色体定位、基因表达原位分析提供精准工具。​

科研级优势，保障实验可靠性​
高纯度与反应活性：纯度≥98%（HPLC 检测），不含 dCTP、ddATP/ddGTP/ddTTP 等杂质（含量＜0.1%），避免非特异性链终止干扰测序或突变检测结果；经酶活验证（与 DNA 聚合酶反应效率＞95%），可高效掺入 DNA 链，确保链终止反应稳定可控，批间反应效率差异＜3%。​
良好溶解性与稳定性：易溶于无酶纯水或常用缓冲液（如 TE 缓冲液，pH 7.5-8.0），溶解度≥10mM，可直接稀释至实验所需浓度（通常测序反应中浓度为 1-10μM）；-20℃避光分装保存可稳定 24 个月，反复冻融（-20℃/ 室温）5 次仍保持 90% 以上活性，无需频繁配制，降低实验误差。​
多场景适配性：兼容多种 DNA 聚合酶（如 T7 DNA 聚合酶、Sequenase™），适配 Sanger 测序、PCR-RFLP、核酸标记等实验平台；支持荧光标记、放射性标记（如 ³²P 标记）或非标记应用，可根据实验需求灵活选择，同时适配手动测序与自动化测序仪（如 ABI 3730xl），满足不同实验室的设备条件。​

从基因序列的精准解析到基因突变的高效验证，再到分子克隆的精细调控，ddCTP 以 “特异性链终止 + 高可靠性” 的核心优势，成为核酸分子生物学研究中不可或缺的试剂。深入探索基因世界的奥秘，从选择专业的 ddCTP 开始！

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